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[求助]
求助，sds-page跑胶都糊成一片了，~~o(>_<)o ~~
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从左到右是maker，样品a，样品b。a和b分别是微生物蛋白和蚯蚓蛋白，提取方法不一样，主要是裂解液成分不一样。maker跑的没问题，应该不是胶制作问题吧。b样品基本上也还可以，但是显然被a影响到了的。我怀疑是不是a样品裂解液中的成分有问题啊，以至于溶解了胶？a确实是浓度有点小，但依稀没糊的地方还可以看到一点点条带的，但是越跑越弥散，最后就这样了。。。桑心 我是半路出家弄分子生物的，初次接触蛋白，还望各位有经验的虫子指点，谢谢！  DSC_0568.jpg [ Last edited by 一苇杭之xmc on 2013-9-27 at 20:59 ] |
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12楼2013-10-08 19:16:02
zhangbighui
金虫 (正式写手)
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2楼2013-09-28 10:47:21
凌波丽
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- 专业: 生物大分子结构与功能
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-28 13:19:15
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myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-28 13:19:15
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可能原因与解决： 1.蛋白质发生了降解。处理办法：重新提取蛋白质，加入蛋白酶抑制剂。 2.样品浓缩效果不好。处理办法：样品上样前煮沸充分，适当增加浓缩胶的长度;保证浓缩胶贮液的pH正确(6.7)，适当降低电压。一般电泳均按这种方式处理，样品稀释适当浓度，加入上样Buffer，离心，沸水煮5min，再离心加样。 3.拖尾严重，样品溶解解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。 处理办法：加样前离心；选择适当的样品缓冲液，加适量样品促溶剂（比如表面活性剂）；电泳缓冲液时间过长，重新配制；降低凝胶浓度。 仅供参考！ |
3楼2013-09-28 11:11:47
4楼2013-09-29 14:27:03