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[交流]
多肽合成成本问题
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| 一般来说，多肽既可以固相化学合成，也可以通过大肠杆菌原核表达，请问哪位知道对于一个多肽，如果要大规模生产，它的残基数达到多少采用大肠杆菌原核表达合算，少于多少时采用固相合成更好？ |
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4楼2013-09-25 11:40:50
5楼2013-09-25 12:23:38
6楼2013-09-26 01:25:56
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8楼2013-09-26 12:26:45
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
fearless_: 金币+10, 不错 2013-09-26 21:39:27
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
fearless_: 金币+10, 不错 2013-09-26 21:39:27
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我们固相合过40左右的，再高就得用片段法了。固相合成受序列影响很大，有时遇到困难序列8肽以下都很难拿到，要是序列易于合成30肽也不难。另外纯化也是如此，杂质和产物差异小就很难拿到纯品。固相法的优势是短肽，修饰肽，改造肽，无法表达的类肽等。 表达大于于100k的不好可溶表达，低于10k不好纯化。不带标签难纯化和检测，带标签不好切除（切除的酶贵）。另外大肠杆菌很容易形成包涵体（错误折叠）。 总的来说30以下固相（最多到50），100以上大肠杆菌。中间的片段或大肠杆菌均可，但都要适当改进。另外序列对多肽的合成影响很大，如果合成困难，就改表达吧。 |
9楼2013-09-26 13:41:44
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2013-09-25 11:13
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2013-09-25 11:21
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