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[交流]
多肽合成成本问题
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| 一般来说,多肽既可以固相化学合成,也可以通过大肠杆菌原核表达,请问哪位知道对于一个多肽,如果要大规模生产,它的残基数达到多少采用大肠杆菌原核表达合算,少于多少时采用固相合成更好? |
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4楼2013-09-25 11:40:50
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
fearless_: 金币+10, 不错 2013-09-26 21:39:27
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
fearless_: 金币+10, 不错 2013-09-26 21:39:27
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我们固相合过40左右的,再高就得用片段法了。固相合成受序列影响很大,有时遇到困难序列8肽以下都很难拿到,要是序列易于合成30肽也不难。另外纯化也是如此,杂质和产物差异小就很难拿到纯品。固相法的优势是短肽,修饰肽,改造肽,无法表达的类肽等。 表达大于于100k的不好可溶表达,低于10k不好纯化。不带标签难纯化和检测,带标签不好切除(切除的酶贵)。另外大肠杆菌很容易形成包涵体(错误折叠)。 总的来说30以下固相(最多到50),100以上大肠杆菌。中间的片段或大肠杆菌均可,但都要适当改进。另外序列对多肽的合成影响很大,如果合成困难,就改表达吧。 |
9楼2013-09-26 13:41:44
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2013-09-25 11:13
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2013-09-25 11:21
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