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19900628

铜虫 (正式写手)

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[交流] 双酶切切出来三条带

用PflmI和BglI双酶切，400左右的是目的条带，可为什么会有两条很亮的条带12bp，1400bp左右的在上面？质粒应该靠3000bp左右的。三条带加一起与原始质粒大小感觉差不多。Marker大小为5000,3000,2000,1500,1200,750,500,250,100

Administrator 2013-09-23 10hr 20min.jpg

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1楼2013-09-23 11:05:15

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19900628

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引用回帖:

15楼: Originally posted by lifuzhu3838 at 2013-09-24 13:31:03
你是要做连接，那其实即使切出多条带也没有关系的，回收你目的位置的条带，可以考虑往下做。不过，这个Bgl I切出来的粘性末端，还是要自己加的酶切位点和目的载体上的酶切位点一致才好连接。...

是啊，就先回收了往下做，这个连接的位点问题都研究过了，理论上还是可以连上的。之前连接挑了好多单菌落，都没连上，现在试试去磷酸化后再连，再连不上，真不知道要怎么办了。。。。