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19900628

铜虫 (正式写手)

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[交流] 双酶切切出来三条带

用PflmI和BglI双酶切，400左右的是目的条带，可为什么会有两条很亮的条带12bp，1400bp左右的在上面？质粒应该靠3000bp左右的。三条带加一起与原始质粒大小感觉差不多。Marker大小为5000,3000,2000,1500,1200,750,500,250,100

Administrator 2013-09-23 10hr 20min.jpg

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1楼2013-09-23 11:05:15

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19900628

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引用回帖:

7楼: Originally posted by bonbonzd at 2013-09-23 15:12:42
可能是没有完全酶切开，最下面的会不会是超螺旋质粒，建议楼主做一下单酶切，然后和未酶切的质粒一块电泳看看

应该不会是没切开，我在切了四个小时的时候取了5ul跑电泳结果和这个差不多，这个是切了十几个小时的，而且我的双酶切是分步酶切的，先plfmI单酶切，跑的电泳没问题，然后再BglI单酶切的。以前也有切过三个小时的，那个时候的条带有四五条，所以这个图应该不是没切开。而且我的三条带加一起喝原始质粒的大小差不多的。