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肠道细菌DNA及PCR结果分析
提了两条鱼的肠道内容物的DNA,用的是omega的试剂盒,并做了PCR (引物是别人给的,我退货用的53度,延伸1min,35个循环), 如图:
孔11和12为提取的DNA
1-4 引物为3F & 4R
5-7为 5F& 6R
8-10 为鱼的基因引物
marker为100bp ladder,最大的带为3kb
结果分析: (1) 8和9模板为细菌DNA,10为鱼的DNA,8-10的结果说明所提取的为细菌DNA而不是鱼的DNA
(2) 5,6模板为提取的两个DNA,7为阴性对照,没有加模板DNA。
(3)1,2为提取的两个DNA,3中模板为大肠杆菌菌业(克隆是LB培养的,不知道能否作为阳性对照?),4为阴性对照
我的问题是,为什么引物3F和4R没有扩出来 (好像很弱很弱)?
提取的细菌DNA是否正常?
如何改进实验?
谢谢
![肠道细菌DNA及PCR结果分析]()
20130913-2.jpg |
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