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lillian菲

银虫 (小有名气)

[求助] PCR大片段问题 已有2人参与

大家好,最近在p片段基因,大概有7500bp,因为需要做后续好多试验,需要PCR产物较多。之前PCR结果很好,最近p的结果总不理想。需要的条带在8000bp左右,但结果在6000bp的条带很亮,根本没法做胶回收,求大家帮忙解决,很急!
PCR大片段问题
360截图20130909163226089.jpg
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yinl03

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-10 22:04:39
引物设计的长一点,适当提高退火温度,或者实在不行,分成2-3段P,然后用overlap拼接起来,这样也是个选择,总比停滞不前好啊!
8楼2013-09-10 19:39:22
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因为吃饭

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-09 20:15:50
产物的特异性不好,提高退火温度呢?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

辩证。
2楼2013-09-09 16:41:44
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南海所老龚

新虫 (正式写手)

楼主用什么酶,扩这么大的片段?
TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
3楼2013-09-09 21:41:22
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先考虑使用专一性高的DNA聚合酶。
4楼2013-09-10 08:39:12
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