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爱上文慧

银虫 (小有名气)

[求助] 当酶的活性中心是Asp和Glu时,哪些离子可以影响到它的活性

我通过网站预测我的酶的蛋白质结构,结果显示酶活性中心可能是Asp和Glu,我想有针对性的做一些实验,不到从哪里下手。
谢谢各位虫友帮忙!
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
爱上文慧: 金币+5, 有帮助, 谢谢你的帮助!! 2013-09-09 08:09:56
引用回帖:
5楼: Originally posted by 爱上文慧 at 2013-09-08 08:38:29
我想问的是可以通过什么实验方法来验证我预测的结果是正确的,就是通过实验来证明酶活性中心确实是GLU和asp。...

用定点突变当然是可以做到,不过还有更简单的方法,直接对于蛋白质进行Asp和Glu进行专一性化学修饰,然后测定酶的活性是否下降。如果Asp和Glu处于活性中心,很可能有超反应性,可以对于Asp和Glu进行专一性化学修饰的试剂加以梯度加入。
可以参考:
Greg T. Hermanson,Bioconjugate Techniques,Elsevier Inc,2008,2nd edition
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6282809
7楼2013-09-08 16:05:13
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-06 09:57:37
都是常见的酶活性中心氨基酸种类,可以参考一般的文献来做。
为什么
2楼2013-09-05 15:56:31
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-06 09:57:44
请你再把问题说明确一些,我不懂你要问什么?室温对于活性中心的化学修饰?还是酶的折叠?酶的催化动力学?酶的调节?。。。
3楼2013-09-05 22:56:32
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爱上文慧

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2013-09-05 15:56:31
都是常见的酶活性中心氨基酸种类,可以参考一般的文献来做。

谢谢您的帮助,请问你做过这类实验吗?我不太熟悉,查文献都无处下手。你知道有哪些常用的方法吗?
每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
4楼2013-09-08 08:35:23
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