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质粒大小:8K左右;都是按试剂盒上的步骤啊:
1. 50ml过夜菌液离心5000rpm 10分钟
2. 将沉淀重悬于4ml Buffer P1
3. 加4ml Buffer P2, 上下颠倒4~6次,在室温静置5min
4.加在4度冰箱放置的Buffer P3, 轻轻混匀至蓝色变为白色,于冰上静置15min
5.12000 rpm, 4度下离心30min
6.QIAGEN-tip 平衡, 加4ml BufferQBT
7.吸取步骤5中的上清于BufferQBT中吸附
8.用10ml 的BufferQC 冲洗QIAGEN-tip柱子两遍(2*10ml)
9.取一只新的管子,用5ml BufferQF冲洗柱子
10.在管中加入3.5ml 的异丙醇来沉淀DNA,混匀后分装成几个小管(约6个1.5ml),4度放 置 30min,之后4度下离心20min,轻轻倒掉液体。
11. 用75%的乙醇(2ml)冲洗DNA, 轻轻上下颠倒,12000 rpm 离心10min,轻轻倒掉液体。
12. 在室温下静置5-10min,用dd水溶解DNA.
在10步之后应该看到有白色的DNA啊,可是我的看不到。 |
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