| 查看: 2712 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
试剂盒提质粒？？？？
|
|||
| 最近用QIGEN试剂盒提大肠杆菌中的质粒，提出来浓度好低啊，才80ng/u；自己又用手提法提，结果很好。但是粗提的质粒用来转化肯定不好。用试剂盒提了3次了，浓度都很低啊，到底是什么问题呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有82人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 病毒包装的质粒用普通的大提和无内毒素大提的区别。
已经有3人回复
- OMEGA提质粒的试剂盒中每种试剂的成分是什么？每种试剂的作用是什么？
已经有3人回复
- 崩溃了 难题 跪求解答：质粒提不出，酶切切不开
已经有30人回复
- 定点突变后转化，提质粒提不出来，求亲们帮帮忙
已经有3人回复
- 请问大家试剂盒提质粒的方法，以及注意事项
已经有5人回复
- 碱法提质粒时遇到的问题！
已经有9人回复
- 大肠杆菌提质粒遇到问题，请高手帮忙
已经有12人回复
- 双酶切，切不下来
已经有19人回复
- 氯霉素抗性的质粒转入氯霉素抗性的宿主菌，请问如何鉴定是否成功转入！？
已经有9人回复
- 如何配制0.37wt%KMnO4+36wt%浓HCL+69wt%浓H2SO4
已经有3人回复
- 试剂盒中提质粒，浓度很小
已经有8人回复
- NanoDrop和Agilent 2100 bioanalyzer检测RNA浓度有多大差异
已经有10人回复
- 提质粒出现4条带？
已经有15人回复
- 提质粒遇到问题
已经有13人回复
- 有人提取过PET-28a的质粒吗？
已经有18人回复
- 提质粒浓度太小，条带不亮，有图求真相
已经有20人回复
- 提质粒时如何去除RNAase
已经有5人回复
- 【求助/交流】弱弱地问一句，质粒提取试剂盒使用前需要灭菌吗
已经有12人回复
- 【求助/交流】质粒降解求教！急！
已经有9人回复
- 【求助/交流】测序信号弱
已经有6人回复
- 【求助/交流】提质粒后跑的电泳图
已经有10人回复
4楼2013-09-05 00:10:24
2楼2013-09-04 23:32:15
3楼2013-09-04 23:34:48
|
质粒大小：8K左右；都是按试剂盒上的步骤啊： 1. 50ml过夜菌液离心5000rpm 10分钟 2. 将沉淀重悬于4ml Buffer P1 3. 加4ml Buffer P2， 上下颠倒4~6次，在室温静置5min 4.加在4度冰箱放置的Buffer P3， 轻轻混匀至蓝色变为白色，于冰上静置15min 5.12000 rpm, 4度下离心30min 6.QIAGEN-tip 平衡， 加4ml BufferQBT 7.吸取步骤5中的上清于BufferQBT中吸附 8.用10ml 的BufferQC 冲洗QIAGEN-tip柱子两遍（2*10ml) 9.取一只新的管子，用5ml BufferQF冲洗柱子 10.在管中加入3.5ml 的异丙醇来沉淀DNA,混匀后分装成几个小管（约6个1.5ml），4度放 置 30min，之后4度下离心20min,轻轻倒掉液体。 11. 用75%的乙醇（2ml)冲洗DNA, 轻轻上下颠倒，12000 rpm 离心10min，轻轻倒掉液体。 12. 在室温下静置5-10min,用dd水溶解DNA. 在10步之后应该看到有白色的DNA啊，可是我的看不到。 |
5楼2013-09-05 08:47:57