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msms

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE 到下方小分子蛋白模糊,分不开

之前发过求助帖,有前辈说可能是缓冲液问题,我又重测的PH,是8.8没错,担心跑胶温度高,用冰浴,但是出来的结果还是这样,连maker都跑的不好,哪位大神能给点建议!
SDS-PAGE 到下方小分子蛋白模糊,分不开
wy 2013-08-28 16hr 30min_副本.jpg
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by msms at 2013-08-30 16:54:03
是水稻籽粒全蛋白,没有到10kd,到30kd就不清晰了,而且以前跑得下面都很清晰...

电泳缓冲液是新配置的吗?样品处理用了足够的DTT或者巯基乙醇了吗?
12楼2013-08-31 02:46:54
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bugakbug

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-30 11:34:59
楼主的PAGE是分层的吗?
还是整片同一浓度,
上下分层的胶片或许可以解决这个问题喔
例:上层4%,下层12%配置。
2楼2013-08-30 09:59:05
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wsh01300

铜虫 (小有名气)


gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-09-01 02:48:12
跑SDS-PAGE要注意配制溶液所使用的水是否是超纯水。
3楼2013-08-30 10:04:45
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msms

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bugakbug at 2013-08-30 09:59:05
楼主的PAGE是分层的吗?
还是整片同一浓度,
上下分层的胶片或许可以解决这个问题喔
例:上层4%,下层12%配置。

是分的,上面4%的浓缩胶,下面12%的分离胶
4楼2013-08-30 11:32:35
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