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BAXIABAXIA

金虫 (正式写手)

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[交流] 纳米金DNA杂化后不变色，不团聚

5’ Thiol (C6)- AAGCTTGTCTGC C -3’

5’-CGAACAGACGGAA-Thiol (C3)-3’

两条巯基分别连接到纳米金上了，但是杂化的时候就是不变色。加热了，冷却也没有用。两个DNA功能化纳米金的混合液稳定的很，加入很浓的NaCl，仍然不团聚。请问有什么解决方案，或者存在着什么问题？

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1楼2013-08-29 16:02:53

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景小莹

金虫 (初入文坛)

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★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-09-04 21:49:27

你好，能否麻烦你把巯基化核酸链接到纳米金上的具体方法给分享一下，我只要连接一种巯基化DNA到纳米金表面，但是一直做的不好。如果能帮忙解决下这个问题，就太感激了。谢谢谢谢~

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2楼2013-08-29 16:20:36

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halfwild

新虫 (初入文坛)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
BAXIABAXIA: 金币+10 2013-11-07 08:49:24
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2014-01-01 17:31:29
markar: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流！ 2014-01-01 17:32:05

小弟分享自己的經驗
奈米金雜交後小弟看過兩種不同的現象
第一種是美國西北大學教授提出的雜交會聚集變色
第二種則像您所遇到的現象
敢問DNA修飾上金球的條件為何（時間？溫度以及最後buffer為何）
過長的修飾時間可能造成DNA大量且緊密排列在金球表面而提供額外的保護效果
如此金球即使雜交也不易聚集
建議閣下可藉由DTT進行競爭將DNA由納米金表面搶下後進行DNA定量
在以較低?舛菵NA或縮短修飾時間合成相對較溶液聚集的DNA納米金球

要確認是否雜交成功建議用agrose gel跑電泳方式試試
小弟於此分享先前經驗
首先以20% SDS 1 ul與DNA奈米金球樣本混合後進行電泳
藉由SDS提供負電荷使納米金朝正電方向泳動
以納米金本身�?色?K藉由泳動距離可評估是否有雜交成功
以上是在下的淺見若有不妥敬請見�?

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8楼2013-11-07 02:09:10

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