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yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币+5, BioEPI+1 2013-09-04 08:24:41
用超滤管除去杂蛋白有点不靠谱,不推荐,也很难实现,去除弥散就更不可能了(也许是我孤陋寡闻。。。)
譬如你的蛋白是40KD的,你用了50KD膜的超滤管,你的蛋白不是都会通过膜的,会有部分通过膜,部分没有通过的,就算是10KD左右的杂蛋白也不会都通过膜的。 超滤管一般用来做蛋白的浓缩,或者更换缓冲液更多一点。提高蛋白纯度很难。一般常用的牌子是millipore的。
明显你的蛋白修饰比较多,不知道你的表达系统是什么,糖基化可能性高一点。你可以用糖基化酶进行酶切,如果是糖基化的话,酶切后应该会呈现出单一条带的。
一步一步!
6楼2013-09-02 13:37:09
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