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lanhuaorchid

金虫 (著名写手)

orchid

[求助] 50L的发酵罐,发酵高手请进,帮忙,回答的越详细越好,非常感谢 已有4人参与

50L的发酵罐,发酵高手请进,帮忙,回答的越详细越好,非常感谢
1个新的50L的发酵罐即将投入使用,用于大肠杆菌培养,请高手指点:
1、        需要准备多大的补料瓶、酸碱瓶之类的附属装置?
2、        一般大家平时用的调节pH的酸碱,一般用什么,浓度是多少,怎么灭菌?
3、        养重组大肠杆菌,常用的消泡剂是什么,用量多少?
4、        都用LB培养么,有什么专用高密度发酵的培养基么?碳源用的葡萄糖还是甘油?
5、一般发酵过程泵会设置什么偶联?溶氧、转速会保持在多少?
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orchid
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danlv

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lanhuaorchid: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢你,学习了 2013-08-27 13:03:24
楼主的问题很笼统呀 所以估计没人能给你一个非常确定的答案

只能给你一些大面上的经验,跟你的实验不保证完全吻合

1,如果补料的东西不太贵的话,多点剩下也没关系,所以宁多勿少
2,通常来说E.coli发酵过程中pH会下降,但是这也要看你发酵过程中的要求;比如你要控pH到6,那么就不需要补酸了,只加一个碱瓶就可;只要挥发性不太大,直接用灭菌锅灭菌就可以,不过从我们之前做的来看酸碱浓度配得大一点,不灭菌也没问题
3,我们实验室消泡剂初始万分之四(体积),然后手动补加
4,看你做的东西了
5,可以不偶联,因为你不需要计算搅拌能耗、供气能耗,而且E.coli不像酵母,个头比较小,搅拌的剪切力对E.coli损伤可以忽略,搅拌大一点没关系。不过要注意搅拌越快,泡沫越多。
6楼2013-08-26 22:54:30
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任_强

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+4, 鼓励热心应助! 2013-08-26 17:54:14
lanhuaorchid(laozuzunzhe代发): 金币+3, 代发! 2013-08-26 17:56:48
你这个也问得太细了,真懂的也不会告诉你的,这是人家的机密,再说就算告诉你也没用,不同的菌种发酵条件大相径庭。
1. 一般补料瓶(含料液和导流管)都是在灭菌锅里灭菌,头用报纸之类的东西报上。
2. pH一般用氢氧化钾溶液调。不知道你的菌使用酸液还是碱液。灭菌同上。
3. 消泡剂种类很多,聚醚类的、也有用烃类、油类的。
4.一般中式的培养基和摇瓶的培养基成分不同。LB应该也可以中式。这个你再查查资料。
5.溶氧和转速根据菌而定。我们这边也是细菌,转速100.溶氧90多。
微生物行业的初学者,望大牛们不吝赐教
2楼2013-08-26 11:15:02
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lanhuaorchid

金虫 (著名写手)

orchid

引用回帖:
2楼: Originally posted by 任_强 at 2013-08-26 11:15:02
你这个也问得太细了,真懂的也不会告诉你的,这是人家的机密,再说就算告诉你也没用,不同的菌种发酵条件大相径庭。
1. 一般补料瓶(含料液和导流管)都是在灭菌锅里灭菌,头用报纸之类的东西报上。
2. pH一般用氢 ...

谢谢,我知道有些东西是机密,但有些东西还是可以交流的
1我看到说有些酸碱是不需灭菌的,直接倒到灭过菌的补料瓶中即可?
2一般消泡剂就是用泡敌、油类吧,大概用什么浓度呢?
3、发酵罐转速100,不低么?
谢谢
orchid
3楼2013-08-26 13:35:26
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任_强

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lanhuaorchid: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2013-09-02 08:27:48
1. 我们这边的酸碱是灭菌的。
2. 50L罐消泡剂加5滴。
3.我们的菌株不大好氧,转速低。你那个根据具体情况定
微生物行业的初学者,望大牛们不吝赐教
4楼2013-08-26 15:07:47
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