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lanhuaorchid金虫 (著名写手)
orchid
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50L的发酵罐,发酵高手请进,帮忙,回答的越详细越好,非常感谢 已有4人参与
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50L的发酵罐,发酵高手请进,帮忙,回答的越详细越好,非常感谢 1个新的50L的发酵罐即将投入使用,用于大肠杆菌培养,请高手指点: 1、 需要准备多大的补料瓶、酸碱瓶之类的附属装置? 2、 一般大家平时用的调节pH的酸碱,一般用什么,浓度是多少,怎么灭菌? 3、 养重组大肠杆菌,常用的消泡剂是什么,用量多少? 4、 都用LB培养么,有什么专用高密度发酵的培养基么?碳源用的葡萄糖还是甘油? 5、一般发酵过程泵会设置什么偶联?溶氧、转速会保持在多少? |
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danlv
木虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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lanhuaorchid: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢你,学习了 2013-08-27 13:03:24
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楼主的问题很笼统呀 所以估计没人能给你一个非常确定的答案 只能给你一些大面上的经验,跟你的实验不保证完全吻合 1,如果补料的东西不太贵的话,多点剩下也没关系,所以宁多勿少 2,通常来说E.coli发酵过程中pH会下降,但是这也要看你发酵过程中的要求;比如你要控pH到6,那么就不需要补酸了,只加一个碱瓶就可;只要挥发性不太大,直接用灭菌锅灭菌就可以,不过从我们之前做的来看酸碱浓度配得大一点,不灭菌也没问题 3,我们实验室消泡剂初始万分之四(体积),然后手动补加 4,看你做的东西了 5,可以不偶联,因为你不需要计算搅拌能耗、供气能耗,而且E.coli不像酵母,个头比较小,搅拌的剪切力对E.coli损伤可以忽略,搅拌大一点没关系。不过要注意搅拌越快,泡沫越多。 |
6楼2013-08-26 22:54:30
【答案】应助回帖
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lanhuaorchid(laozuzunzhe代发): 金币+3, 代发! 2013-08-26 17:56:48
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你这个也问得太细了,真懂的也不会告诉你的,这是人家的机密,再说就算告诉你也没用,不同的菌种发酵条件大相径庭。 1. 一般补料瓶(含料液和导流管)都是在灭菌锅里灭菌,头用报纸之类的东西报上。 2. pH一般用氢氧化钾溶液调。不知道你的菌使用酸液还是碱液。灭菌同上。 3. 消泡剂种类很多,聚醚类的、也有用烃类、油类的。 4.一般中式的培养基和摇瓶的培养基成分不同。LB应该也可以中式。这个你再查查资料。 5.溶氧和转速根据菌而定。我们这边也是细菌,转速100.溶氧90多。 |

2楼2013-08-26 11:15:02
lanhuaorchid
金虫 (著名写手)
orchid
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