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lanhuaorchid

金虫 (著名写手)

orchid

[求助] 50L的发酵罐,发酵高手请进,帮忙,回答的越详细越好,非常感谢 已有4人参与

50L的发酵罐,发酵高手请进,帮忙,回答的越详细越好,非常感谢
1个新的50L的发酵罐即将投入使用,用于大肠杆菌培养,请高手指点:
1、        需要准备多大的补料瓶、酸碱瓶之类的附属装置?
2、        一般大家平时用的调节pH的酸碱,一般用什么,浓度是多少,怎么灭菌?
3、        养重组大肠杆菌,常用的消泡剂是什么,用量多少?
4、        都用LB培养么,有什么专用高密度发酵的培养基么?碳源用的葡萄糖还是甘油?
5、一般发酵过程泵会设置什么偶联?溶氧、转速会保持在多少?
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orchid
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任_强

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lanhuaorchid: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2013-09-02 08:27:48
1. 我们这边的酸碱是灭菌的。
2. 50L罐消泡剂加5滴。
3.我们的菌株不大好氧,转速低。你那个根据具体情况定
微生物行业的初学者,望大牛们不吝赐教
4楼2013-08-26 15:07:47
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任_强

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+4, 鼓励热心应助! 2013-08-26 17:54:14
lanhuaorchid(laozuzunzhe代发): 金币+3, 代发! 2013-08-26 17:56:48
你这个也问得太细了,真懂的也不会告诉你的,这是人家的机密,再说就算告诉你也没用,不同的菌种发酵条件大相径庭。
1. 一般补料瓶(含料液和导流管)都是在灭菌锅里灭菌,头用报纸之类的东西报上。
2. pH一般用氢氧化钾溶液调。不知道你的菌使用酸液还是碱液。灭菌同上。
3. 消泡剂种类很多,聚醚类的、也有用烃类、油类的。
4.一般中式的培养基和摇瓶的培养基成分不同。LB应该也可以中式。这个你再查查资料。
5.溶氧和转速根据菌而定。我们这边也是细菌,转速100.溶氧90多。
微生物行业的初学者,望大牛们不吝赐教
2楼2013-08-26 11:15:02
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lanhuaorchid

金虫 (著名写手)

orchid

引用回帖:
2楼: Originally posted by 任_强 at 2013-08-26 11:15:02
你这个也问得太细了,真懂的也不会告诉你的,这是人家的机密,再说就算告诉你也没用,不同的菌种发酵条件大相径庭。
1. 一般补料瓶(含料液和导流管)都是在灭菌锅里灭菌,头用报纸之类的东西报上。
2. pH一般用氢 ...

谢谢,我知道有些东西是机密,但有些东西还是可以交流的
1我看到说有些酸碱是不需灭菌的,直接倒到灭过菌的补料瓶中即可?
2一般消泡剂就是用泡敌、油类吧,大概用什么浓度呢?
3、发酵罐转速100,不低么?
谢谢
orchid
3楼2013-08-26 13:35:26
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wentanbaodao

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, good! 2013-08-26 17:55:06
lanhuaorchid: 金币+8, ★★★很有帮助, 谢谢你,学习中 2013-08-27 13:02:36
看到MM上罐,上来发表一下,因为我也马上要上个做大肠的罐。
1 需要准备多大的补料瓶、酸碱瓶之类的附属装置?
    答:这个真的不一定,按你装料30L来算的话,你初始培养基应该在18~20L,补料瓶应该在1、2L左右。但是看你流加的速度和物料了,不一样。反正我做的实验,2L足够了。酸碱瓶是必备的,不过一般没有补酸的。
2 一般大家平时用的调节pH的酸碱,一般用什么,浓度是多少,怎么灭菌?
  我没有调过酸,所以这一点不回答。碱是用的氨水,没有浓度,只是把补料瓶空消,把氨水直接倒进去就行。这是实验室,生产上氨水就得滤膜过一下了。
3 养重组大肠杆菌,常用的消泡剂是什么,用量多少?
  消泡肯定是用泡敌,只不过尽量不加是不加,少量多次吧,可以放点油在补料管中。
4 都用LB培养么,有什么专用高密度发酵的培养基么?碳源用的葡萄糖还是甘油?
  种子用LB,但是发酵培养基还是较为复杂的,起码加了不少的无机盐成分,不能一概而论的。碳源葡萄糖和甘油都有用的,看你的产品是什么。
5.一般发酵过程泵会设置什么偶联?溶氧、转速会保持在多少?
  设置转速与溶氧耦联,溶氧在30%以上,转速看罐的大小,你50L的罐,至少也要保持在100以上
5楼2013-08-26 16:26:47
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