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lanhuaorchid

金虫 (著名写手)

orchid

[求助] 50L的发酵罐,发酵高手请进,帮忙,回答的越详细越好,非常感谢 已有4人参与

50L的发酵罐,发酵高手请进,帮忙,回答的越详细越好,非常感谢
1个新的50L的发酵罐即将投入使用,用于大肠杆菌培养,请高手指点:
1、        需要准备多大的补料瓶、酸碱瓶之类的附属装置?
2、        一般大家平时用的调节pH的酸碱,一般用什么,浓度是多少,怎么灭菌?
3、        养重组大肠杆菌,常用的消泡剂是什么,用量多少?
4、        都用LB培养么,有什么专用高密度发酵的培养基么?碳源用的葡萄糖还是甘油?
5、一般发酵过程泵会设置什么偶联?溶氧、转速会保持在多少?
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orchid
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wangju87c

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一般都是在5L罐上把工艺摸透再上大罐的,直接从摇瓶上50L大罐?这个有点悬
如果补料的话,一般都是2L,随OD不同不加
基因工程菌都有抗性,一般会加抗生素。噬菌体很脆弱,酸碱中无法存活,所以酸碱不必灭菌,但是避免管路污染噬菌体。
消泡剂在加罐基时加入,一起实消
溶氧开始调200也可以,后面转速上去了,到最高时还要通纯氧的
哥已婚
13楼2014-06-24 12:15:03
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任_强

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+4, 鼓励热心应助! 2013-08-26 17:54:14
lanhuaorchid(laozuzunzhe代发): 金币+3, 代发! 2013-08-26 17:56:48
你这个也问得太细了,真懂的也不会告诉你的,这是人家的机密,再说就算告诉你也没用,不同的菌种发酵条件大相径庭。
1. 一般补料瓶(含料液和导流管)都是在灭菌锅里灭菌,头用报纸之类的东西报上。
2. pH一般用氢氧化钾溶液调。不知道你的菌使用酸液还是碱液。灭菌同上。
3. 消泡剂种类很多,聚醚类的、也有用烃类、油类的。
4.一般中式的培养基和摇瓶的培养基成分不同。LB应该也可以中式。这个你再查查资料。
5.溶氧和转速根据菌而定。我们这边也是细菌,转速100.溶氧90多。
微生物行业的初学者,望大牛们不吝赐教
2楼2013-08-26 11:15:02
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lanhuaorchid

金虫 (著名写手)

orchid

引用回帖:
2楼: Originally posted by 任_强 at 2013-08-26 11:15:02
你这个也问得太细了,真懂的也不会告诉你的,这是人家的机密,再说就算告诉你也没用,不同的菌种发酵条件大相径庭。
1. 一般补料瓶(含料液和导流管)都是在灭菌锅里灭菌,头用报纸之类的东西报上。
2. pH一般用氢 ...

谢谢,我知道有些东西是机密,但有些东西还是可以交流的
1我看到说有些酸碱是不需灭菌的,直接倒到灭过菌的补料瓶中即可?
2一般消泡剂就是用泡敌、油类吧,大概用什么浓度呢?
3、发酵罐转速100,不低么?
谢谢
orchid
3楼2013-08-26 13:35:26
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任_强

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lanhuaorchid: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2013-09-02 08:27:48
1. 我们这边的酸碱是灭菌的。
2. 50L罐消泡剂加5滴。
3.我们的菌株不大好氧,转速低。你那个根据具体情况定
微生物行业的初学者,望大牛们不吝赐教
4楼2013-08-26 15:07:47
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