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xiaoganghehe铜虫 (著名写手)
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该怎么理解胞内酶和胞外酶？高速离心能让大肠杆菌细胞破裂吗？
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小虫是学材料的，最近在做关于大肠杆菌的实验，但对生物一窍不通，因此请教几个问题。 我的实验过程如下：在含乳糖的培养基中培养大肠杆菌，目的是诱导大肠杆菌产生β－半乳糖苷酶。随后离心（转速5000），用NaCl溶液清洗菌体，再离心（转速7000），然后用PBS溶液清洗菌体沉淀，得到菌体浊液。然后再往菌体浊液中加入ONPG，ONPG是β－半乳糖苷酶的底物。论文上说，对于大肠杆菌，β－半乳糖苷酶是胞内酶。但在离心分离之后，我往菌液中加入ONPG，溶液很快就变成黄色了。 所以很困惑：既然β－半乳糖苷酶是胞内酶，为什么ONPG很快就水解了呢？难道是β－半乳糖苷酶能被大肠杆菌很快释放到溶液中？或者离心能使大肠杆菌细胞破裂，β－半乳糖苷酶被释放出来？ 希望能听听高人的意见，能给出意见和建议最好！ |
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