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andia

木虫 (著名写手)

[交流] 细胞培养出现丝状物,why?

细胞培养过程中,在显微镜下可以明显的看到培养基中有丝状的类似于头发样的物体存在,而且还不少,请问有没有哪位高手知道是怎么回事啊?
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reasonspare

木虫 (著名写手)


telomerase(金币+1,VIP+0):谢谢分析!!!
如果是液体培养基,有两种可能,
1 你摇的不充分,形成絮状沉淀
2 真菌污染
大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
2楼2007-11-13 10:31:19
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

★ ★
asr(金币+2,VIP+0):thanks,辛苦了.
十之八九是污染了!!  按你描述的,像是真菌污染!!


(一)污染的类型
        细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。
1、细菌污染
        细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素,也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较常见。
        培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变。污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡。
2、真菌污染
        真菌污染是细胞培养过程中最常见的一种,最常见的真菌有烟曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。
        培养细胞受真菌污染后,可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点,有的散在生长,培养液一般不发生混浊;倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中,有的呈链状排列。
        真菌污染后,细胞生长变慢,但最后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。
3、支原体污染
        支原体是介于细菌与病毒之间能独立生活的最小微生物,最小直径0.2μm,一般过滤除菌无法去除它,光镜下难以看清它的形态结构。开始不易发现,能在偏碱条件下生存,对青霉素有抗药性。多吸附于细胞表面或散在于细胞之间。
        培养细胞受支原体污染后,部分敏感细胞可见细胞生长增殖变慢,部分细胞变圆,从瓶壁脱落。但多数细胞污染后无明显变化,或略有变化,若不及时处理,还会产生交叉污染。

[ Last edited by telomerase on 2007-11-13 at 11:22 ]
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
3楼2007-11-13 11:15:52
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)


asr(金币+1,VIP+0):thanks:D:D.
如果培养几天没什么大异常,那可能不是真菌污染。
也许是空气中的纤维,比如棉花中的,没关系。如果都灭过菌。
4楼2007-11-13 11:25:58
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blanco7

金虫 (小有名气)

大约一定是长菌了~
培养时要加入Penicilin和Streptomycin Sulfate,这样不容易被细菌污染
操作不用那么谨小慎微,但所有东西进超净台前要注意消毒
5楼2007-11-13 12:34:17
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vicarner

金虫 (正式写手)

注意观察,如果不影响细胞培养,则不需要考虑。
可能原因:
1.杂菌污染。有可能是真菌或是其他微生物。可以通过划线分离的方法进行确证。
2.丝状纤维类物质。
因为没有图片,因此无法进一步确证。
6楼2007-11-13 13:31:53
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jingjingli527

金虫 (小有名气)

感谢大家!

经过几天的培养,细胞生长的还是非常好的,并没有什么异样,看起来似乎不像是污染的样子,而且由此培养皿分出来的其它培养皿的细胞中再没有出现丝状物。
     自己分析原因可能是在吹打细胞时枪头划到了培养皿的底部,留下了痕迹。
     谢谢各位的建议,本人以后在操作过程中一定注意,尽量不污染!
     再次感谢!~~~
7楼2007-11-15 00:42:57
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andia

木虫 (著名写手)

七楼的贴是本人发的,用了同学的号,抱歉啊!
8楼2007-11-15 00:47:33
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hulinyong

金虫 (正式写手)

我觉得除了可能是真菌污染外,还有可能是混进去纱布或是脱脂棉上的棉线了
你放一段时间再看看数量有没有增加,有增加的是前者
9楼2007-11-15 09:49:12
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