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xiudan1225

金虫 (正式写手)

[求助] ANS法测定蛋白质疏水性 已有1人参与

我使用了ANS法测定蛋白质疏水性,得出数据如下,左边为蛋白浓度mg/mL,右边为荧光强度,现在不知道结果应该怎么分析,查文献得知要求初始点的斜率,我按照求(0,0)点和(0.05,  72.69)的斜率,得出的值大约1400多,但是查相关文献的疏水值大都在30--150之间,不知道这个有没有统一的算法或者有没有标准可查?
0.05   72.69
0.1          106.25
0.3     240.1
0.5          316.7
1          539.3
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiudan1225: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-09-25 10:14:52
我个人认为,你的实验在方法上可能存在问题,我给你一份文献用于参考,http://www.docin.com/p-300924658.html,希望对你有用。
2楼2013-08-19 13:05:48
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钢琴兔

银虫 (小有名气)

请教楼主一个问题,ANS你是怎么溶解的呀?我用了0.01M pH7的缓冲溶液, 配8mmol/l的ANS,结果是牛奶状的,静置一会还要些许沉淀,请问正常吗?
3楼2014-04-04 11:30:20
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钢琴兔

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不是蛋白浓度对荧光强度作线性回归(r2>=0.99)吗?公式的斜率就是你的疏水性,
4楼2014-04-11 20:28:44
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钢琴兔

银虫 (小有名气)

说错了,是荧光强度对蛋白浓度作线性回归
5楼2014-04-11 20:31:23
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xiudan1225

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 钢琴兔 at 2014-04-11 20:31:23
说错了,是荧光强度对蛋白浓度作线性回归

你好,我后来没有做这个,不了了之了
6楼2014-04-18 13:39:25
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钢琴兔

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xiudan1225 at 2014-04-18 13:39:25
你好,我后来没有做这个,不了了之了...

哦 我也暂时没做了 老做不出来
7楼2014-04-19 09:01:12
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一叶知秋霁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 钢琴兔 at 2014-04-04 11:30:20
请教楼主一个问题,ANS你是怎么溶解的呀?我用了0.01M pH7的缓冲溶液, 配8mmol/l的ANS,结果是牛奶状的,静置一会还要些许沉淀,请问正常吗?

我溶解的条件跟您一样的,现象也是相同的,不知道是不是有问题。
8楼2015-12-15 17:51:46
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平生不服输

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 钢琴兔 at 2014-04-04 11:30:20
请教楼主一个问题,ANS你是怎么溶解的呀?我用了0.01M pH7的缓冲溶液, 配8mmol/l的ANS,结果是牛奶状的,静置一会还要些许沉淀,请问正常吗?

我做的静置下面也是白色沉淀,混合的话加酶标板不均匀也会有泡沫呀,您是怎么解决的呀
9楼2016-01-14 21:30:00
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lfg110

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 一叶知秋霁 at 2015-12-15 17:51:46
我溶解的条件跟您一样的,现象也是相同的,不知道是不是有问题。...

利用pH8.0的磷酸缓冲溶液会好点。
10楼2016-03-17 16:10:36
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