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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » ANS法测定蛋白质疏水性
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xiudan1225

金虫 (正式写手)

[求助] ANS法测定蛋白质疏水性 已有1人参与

我使用了ANS法测定蛋白质疏水性，得出数据如下，左边为蛋白浓度mg/mL，右边为荧光强度，现在不知道结果应该怎么分析，查文献得知要求初始点的斜率，我按照求（0，0）点和（0.05，  72.69）的斜率，得出的值大约1400多，但是查相关文献的疏水值大都在30--150之间，不知道这个有没有统一的算法或者有没有标准可查？
0.05   72.69
0.1          106.25
0.3     240.1
0.5          316.7
1          539.3
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1楼 2013-08-19 11:53:52
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiudan1225: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-09-25 10:14:52
我个人认为，你的实验在方法上可能存在问题，我给你一份文献用于参考，http://www.docin.com/p-300924658.html，希望对你有用。
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2楼2013-08-19 13:05:48
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钢琴兔

银虫 (小有名气)
请教楼主一个问题，ANS你是怎么溶解的呀？我用了0.01M pH7的缓冲溶液， 配8mmol/l的ANS，结果是牛奶状的，静置一会还要些许沉淀，请问正常吗？
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3楼2014-04-04 11:30:20
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钢琴兔

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不是蛋白浓度对荧光强度作线性回归（r2>=0.99）吗？公式的斜率就是你的疏水性，
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4楼2014-04-11 20:28:44
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钢琴兔

银虫 (小有名气)
说错了，是荧光强度对蛋白浓度作线性回归
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5楼2014-04-11 20:31:23
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xiudan1225

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 钢琴兔 at 2014-04-11 20:31:23
说错了，是荧光强度对蛋白浓度作线性回归

你好，我后来没有做这个，不了了之了
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6楼2014-04-18 13:39:25
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钢琴兔

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiudan1225 at 2014-04-18 13:39:25
你好，我后来没有做这个，不了了之了...

哦 我也暂时没做了 老做不出来
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7楼2014-04-19 09:01:12
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一叶知秋霁

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 钢琴兔 at 2014-04-04 11:30:20
请教楼主一个问题，ANS你是怎么溶解的呀？我用了0.01M pH7的缓冲溶液， 配8mmol/l的ANS，结果是牛奶状的，静置一会还要些许沉淀，请问正常吗？

我溶解的条件跟您一样的，现象也是相同的，不知道是不是有问题。
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8楼2015-12-15 17:51:46
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平生不服输

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 钢琴兔 at 2014-04-04 11:30:20
请教楼主一个问题，ANS你是怎么溶解的呀？我用了0.01M pH7的缓冲溶液， 配8mmol/l的ANS，结果是牛奶状的，静置一会还要些许沉淀，请问正常吗？

我做的静置下面也是白色沉淀，混合的话加酶标板不均匀也会有泡沫呀，您是怎么解决的呀
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9楼2016-01-14 21:30:00
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lfg110

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 一叶知秋霁 at 2015-12-15 17:51:46
我溶解的条件跟您一样的，现象也是相同的，不知道是不是有问题。...

利用pH8.0的磷酸缓冲溶液会好点。
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10楼2016-03-17 16:10:36
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