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ycwd

新虫 (初入文坛)

[求助] 用NaOH和KOH调节Ph 有什么区别,在用EDTA滴钙的实验中(使用钙黄绿素作指示剂)

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用NaOH和KOH调节Ph 有什么区别,在用EDTA滴钙的实验中(使用钙黄绿素作指示剂)
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hooyawang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xx小小xx at 2013-08-18 20:50:41
这个不是条件pH的问题
钙黄绿素是荧光指示剂,在终点的时候容易出现残余荧光的现象,就是有明显的颜色变化,但是荧光不会完全消失。这个时候终点判断不是太好掌握。
一般钠大量存在时,残留荧光的现象会更加明显, ...

你好,我做的实验是用钙黄绿素作指示剂,但是在反应还没开始的时候就有荧光了,刚开始我们配的试剂是用氯化锰淬灭钙黄绿素的荧光,它们两个按照我们的protocol上的浓度混合在一起确实没有荧光但是加入其他缓冲液混合在一起后,就有荧光了,不知道是为什么
LAMP
5楼2014-11-23 19:20:44
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xx小小xx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个不是条件pH的问题
钙黄绿素是荧光指示剂,在终点的时候容易出现残余荧光的现象,就是有明显的颜色变化,但是荧光不会完全消失。这个时候终点判断不是太好掌握。
一般钠大量存在时,残留荧光的现象会更加明显,而钾离子产生的残留荧光会比较小,所以通常要求用氢氧化钾
另外,钙黄绿素都是不单独用的,要与其他指示剂混合使用,也是通过颜色互补的原理掩蔽残余荧光
2楼2013-08-18 20:50:41
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ycwd

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xx小小xx at 2013-08-18 20:50:41
这个不是条件pH的问题
钙黄绿素是荧光指示剂,在终点的时候容易出现残余荧光的现象,就是有明显的颜色变化,但是荧光不会完全消失。这个时候终点判断不是太好掌握。
一般钠大量存在时,残留荧光的现象会更加明显, ...

哦, 可能是这样的,因为我们实验室标定EDTA的时候是用NaOH调节Ph的,所以今天我在测定样品中钙含量的时候就加了NaOH调节PH,我个人的目的是为了让实验的条件尽量一致,因为我们要做空白实验的; 然而没想到今天滴定的时候绿色荧光就是不消失(但是我们实验室要求是要用KOH调节PH的,所以我也一直不明白,今天就自己私底下用了一下NaOH调节PH),谢谢了  , 明天做一个对比实验看看
3楼2013-08-18 22:56:29
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xx小小xx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
ycwd: 金币+5, ★★★★★最佳答案, thank you 2013-08-19 21:27:18
如果残余荧光很严重,可能不仅仅是钠离子的问题
钙黄绿素有时候纯度不够,里面会含有比较多的荧光黄,也会导致终点荧光不能完全消失
4楼2013-08-18 23:27:03
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