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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 线粒体苹果酸脱氢酶酶活结果分析
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圣诞小子

金虫 (小有名气)

[求助] 线粒体苹果酸脱氢酶酶活结果分析

各位高手，我要测线粒体苹果酸脱氢酶的酶活。现在测得了每隔一分钟的OD变化值，用的是酶标仪测得，放96孔板的。但是不知道要用那个公式来计算酶活或是比活力，文献有好几种方法，但是都涉及到比色皿的光径。不知如何是好。请教各位做过的高手指点。
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1楼 2013-08-15 23:00:15
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0405lanfeng

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-08-16 08:40:03
圣诞小子: 金币+2 2013-08-17 09:10:31
没做过这个酶活，但是可以通过做标准曲线来测吗？应该可以吧

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2楼2013-08-16 07:37:58
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圣诞小子

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 0405lanfeng at 2013-08-16 07:37:58
没做过这个酶活，但是可以通过做标准曲线来测吗？应该可以吧

也许可以吧，我也是第一次做，查文献上至今还没看到用标曲的，谢谢！
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3楼2013-08-16 08:15:28
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mas1208ter

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
圣诞小子: 金币+3 2013-08-17 09:10:38
如果用酶标仪就要用到校准曲线的，如果用紫外分光光度计是可以计算的，不行弄点标准品吧！
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三十年来寻刀剑，几回落叶又抽枝，自从一见桃花后，直至如今更不疑！
4楼2013-08-16 08:41:38
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圣诞小子

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mas1208ter at 2013-08-16 08:41:38
如果用酶标仪就要用到校准曲线的，如果用紫外分光光度计是可以计算的，不行弄点标准品吧！

你说的我没太明白，有参考资料或者更详细的解释吗？谢谢！初次接触测这个酶活，感觉很棘手，谢谢！
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5楼2013-08-16 08:50:59
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jzhe961

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
圣诞小子: 金币+5, ★有帮助 2013-08-17 09:10:13
malate dehydrogenase 实质上是通过NADH的生成变化来反映酶活的。酶标仪测定的是NADH OD340吸收值。所谓的标准曲线就是确定NADH 在酶标仪上的摩尔吸光系数，用其将delta OD340 转化为Delta NADH.
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6楼2013-08-16 23:09:27
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圣诞小子

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jzhe961 at 2013-08-16 23:09:27
malate dehydrogenase 实质上是通过NADH的生成变化来反映酶活的。酶标仪测定的是NADH OD340吸收值。所谓的标准曲线就是确定NADH 在酶标仪上的摩尔吸光系数，用其将delta OD340 转化为Delta NADH.

貌似明白点了 谢谢
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7楼2013-08-17 09:10:54
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