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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 特定蛋白定量
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yesexue

铁虫 (初入文坛)

[求助] 特定蛋白定量

请问一下各位大虾们，做某一蛋白定量除了用抗体做之外，还有没有其他的方法，如果用的话，精确性怎么样，谢谢
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1楼 2013-08-15 10:17:40
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zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-15 16:57:46
yesexue: 金币+2, ★有帮助 2013-08-18 09:09:23
蛋白定量精略的话可以跑个SDS-PAGE，前面点样几个标准蛋白(BSA)不同稀释度的样品，后面点上自己的样品，最后比对条带大小便可知蛋白含量。
精确一下的可以使用BCA法测蛋白浓度，准确性较高。
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成功，就是成为你想成为的人
2楼2013-08-15 10:50:18
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yesexue

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangbighui at 2013-08-15 10:50:18
蛋白定量精略的话可以跑个SDS-PAGE，前面点样几个标准蛋白(BSA)不同稀释度的样品，后面点上自己的样品，最后比对条带大小便可知蛋白含量。
精确一下的可以使用BCA法测蛋白浓度，准确性较高。

要做特定蛋白的定量，是不是要先把这种蛋白纯化出来啊？
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3楼2013-08-16 09:27:04
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zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yesexue at 2013-08-16 09:27:04
要做特定蛋白的定量，是不是要先把这种蛋白纯化出来啊？...

我说的PAGE法可以不用纯化蛋白，只要知道你目的蛋白的位置就可以比对。如果想用BCA法就需要纯化蛋白。你的蛋白是原核表达还是别的什么。
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成功，就是成为你想成为的人
4楼2013-08-16 09:35:37
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yesexue

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangbighui at 2013-08-16 09:35:37
我说的PAGE法可以不用纯化蛋白，只要知道你目的蛋白的位置就可以比对。如果想用BCA法就需要纯化蛋白。你的蛋白是原核表达还是别的什么。...

我做的蛋白是天然蛋白，是植物中固有的
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5楼2013-08-17 09:51:35
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zhangbighui

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yesexue at 2013-08-17 09:51:35
我做的蛋白是天然蛋白，是植物中固有的...

这样的话只能做PAGE检测了，不过还可以上色谱也可以知道你蛋白的浓度。
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成功，就是成为你想成为的人
6楼2013-08-18 08:13:18
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