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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

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[求助] 细胞计数“稀释倍数”相关问题已有1人参与

我查看了许多有关“细胞计数板使用方法”的介绍但都是，类型、计算公式方面的问题，而有关“稀释倍数”问题多是模糊带过。希望小木虫的高手帮我解惑！！！谢谢！！！
计算公式多为两种：
1、（细胞数）/ml=(四大格细胞数/4)*10^4*稀释倍数
2、（细胞数）/ml=(80小格细胞数/80)*10^4*稀释倍数或（细胞数）/ml=(100小格细胞数/100)*10^4*稀释倍数

问题是：假如细胞离心后用1ml重悬，再从中取100ul的重悬液，再加100ul的PBS稀释，这里是稀释了两倍吗？那么根据公式算出的是1ml重悬液的细胞数，还是100ul的细胞数啊？还有就是向载玻片上加细胞液时多少都无所谓是吧？只要不是太多就行是吧？

请高手详解“稀释倍数问题”，谢谢！！！

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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。

1楼2013-08-11 19:27:14

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引用回帖:

10楼: Originally posted by organism at 2013-08-13 16:03:38
2倍；1ml；最后刚好覆盖。
每格0.1ul，乘以10^4＝1ml，所以稀释倍数就是待测到滴加之间的稀释倍数。

1、你的意思是用胰酶消化，DMEM终止消化后进行计数。但是如果要进行后续的实验，会不会有影响啊？
2、我知道是算的重悬后的细胞浓度。你的意思的只要不进行重悬直接进行测定就是比较接近原培养液的细胞浓度了是吗？
3、我上面说的是计算的“稀释前”的1ml溶液的细胞数吧？也就是100ul对应的1ml的细胞数是吧？而不是100+100=200ul所对应的1ml的细胞数吧？