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damon352

禁虫 (初入文坛)

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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我帮你总结下,1:复苏时间比较短,这个可能是关键
2:染菌,如果排除第一,这个是主要原因
其他的我觉得操作上应该不会犯很大的错吧,
我们实验室做的克隆是氨苄抗性的,有次氨苄有点失效了,就是液体里面很多菌,但是固体长的很少,而且P下来都测不出来,不知道对楼主有没有参考
7楼2013-08-11 15:19:39
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查看全部 7 个回答

转基因猴子

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
染菌了,或者平板卡那浓度高了

[ 发自小木虫客户端 ]
我还年轻,我要上路!
2楼2013-08-08 16:55:48
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励发帖交流! 2013-08-08 18:32:07
amisking: 回帖置顶 2013-08-08 18:32:09
damon352: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-08-14 16:47:36
转化结束后不能立刻铺板的,因为虽然质粒已经转进去了,但是抗抗生素的蛋白还没有表达出来,所以直接铺板会被抗生素杀死。建议做完转化后,先在不含抗生素的LB液体培养基里摇半小时再铺板。至于为什么在含有抗生素的液体培养基里能生长,我理解是大肠杆菌在液体培养基里肯定比在固体培养基上长的快,在液体培养基里虽然也有被杀死的,还是有存活下来的。
3楼2013-08-08 17:05:59
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arniekyo

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在液体里面培养的菌能提出质粒么,要是能提出来,说明板子有问题,要是提不出来说明菌液污染
4楼2013-08-08 18:04:46
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