我现在要做一个鸽子通过线粒体 DNA 的D-loop 区突变情况进行不同品种鸽子的系统进化分析。D-loop 区是高突变区,鸽子的这段序列有两千个碱基对。现在已经设计好了一对引物,产物有 900 bp。琼脂糖跑胶效果挺好,本想通过直接测序进行序列突变分析,可测回的结果说不理想,条带很乱。问过别人,说是可能这段区域突变比较多,因为同一样本提取的线粒体细胞本身之间突变就不一致,有缺失、插入等,就会导致个样测序的混乱。这段话我不甚理解,尤其是个体不同细胞之间 DNA 序列不是一样的吗?怎么不同细胞突变也不一样呢?如果是这种情况,怎么处理我的测序结果呢?
希望论坛里面的高手不吝赐教啊!