24小时热门版块排行榜    

查看: 2192  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

清清柳岸枫

铁虫 (小有名气)

[求助] 这句文献是什么意思?

本人从没做过蛋白提取,看了篇文献毫无想法,遇到这么几句,是什么意思?谢谢各位前辈。

1.the precipitate was dissolved in 20mM Tris-HCl buffer(PH7.4) and dialysed against the same buffer.

2.after 16h of dialysis, the sample was applied onto a ConA sepharose 4B column pre-equilibrated with equilibration buffer(20mM Tris-HCl, 1M NaCl,1mM CaCl2, MgCl2, MnCl2) at a flow rate of 0.1 ml/min.

问题:
1.第一句的里的20mM Tris-HCl buffer(PH7.4) 怎么配?
2.against the same buffer 什么意思?透析的话外面不是用水吗?
3.20mM Tris-HCl, 1M NaCl,1mM CaCl2, MgCl2, MnCl2什么意思,是说含有浓度1M的 NaCl和1mM的 CaCl2, 1mM的MgCl2, 1mM的MnCl2的20mM Tris-HCl溶液来冲吗?就这一种溶液还是说用上面几种溶液依次冲?

跪谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 清清柳岸枫 at 2013-08-05 16:12:08
真心跪谢啊。还有一点哈,这个20%什么意思,是不是说我100ml的溶液就得加入20g的硫酸铵呢?后面再加到60g,是这样吗亲?...

不是,是饱和度,工具书和网上都能找到相应的表格的http://wenku.baidu.com/view/8b8e9b4af7ec4afe04a1df55.html
基础知识不牢固呀!
8楼2013-08-05 16:15:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
清清柳岸枫(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-05 13:30:02
1、Tris-HCl的配方网上下一个就好了,或者直接配20mM Tris-然后用HCl调pH7.4,定容。
2、用含有浓度1M的 NaCl和1mM的 CaCl2, 1mM的MgCl2, 1mM的MnCl2的20mM Tris-HCl溶液来洗。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-08-05 10:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清清柳岸枫

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-08-05 10:17:29
1、Tris-HCl的配方网上下一个就好了,或者直接配20mM Tris-然后用HCl调pH7.4,定容。
2、用含有浓度1M的 NaCl和1mM的 CaCl2, 1mM的MgCl2, 1mM的MnCl2的20mM Tris-HCl溶液来洗。

嗯,谢谢。还有一句哈,against the same buffer什么意思呢?
还有一句: proteins in the supernatant were fractionated by ammonium sulphate precipitation(20%-60%)什么意思?这里的20%-60%啥意思.?
3楼2013-08-05 11:30:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
清清柳岸枫: 金币+3, ★★★★★最佳答案, 跪谢! 2013-08-05 15:31:53
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-05 21:38:09
dialysed against the same buffer就是用同样的缓冲液透析。
proteins in the supernatant were fractionated by ammonium sulphate precipitation(20%-60%)的意思是上清用20-60%饱和度硫酸铵分级沉淀,即用两次沉淀,先用20%的沉淀下,收集上清,然后再加硫酸铵至60%饱和度再次沉淀,收集沉淀。
4楼2013-08-05 14:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-30 02:29 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-30 02:22 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:47 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:45 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:34 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 01:14 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
请填处理意见