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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求教，高效液相跑出来的图谱是这样该怎么解决
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轰隆隆

铜虫 (小有名气)

[求助] 求教，高效液相跑出来的图谱是这样该怎么解决

测的是一种吲哚类物质，购买的标准品是sigma的，用荧光检测器监测，流动相为甲醇：水=60:40，标准品用流动相配。在用标准品跑的时候就出现了下图中的问题，首先是在五分钟的时候出现了图中这么一个怪峰随着标准品浓度减小峰值也不变，但是浓度小时峰是尖的。其次，随着标准品浓度的减小，出的图基线很不平（第3、4副图）。请问这是什么问题导致的？该怎么解决？请高手指教！
求教，高效液相跑出来的图谱是这样该怎么解决
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求教，高效液相跑出来的图谱是这样该怎么解决-1
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求教，高效液相跑出来的图谱是这样该怎么解决-2
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求教，高效液相跑出来的图谱是这样该怎么解决-3
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求教，高效液相跑出来的图谱是这样该怎么解决-4
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鸟儿大了，什么林子都有！
1楼 2013-08-02 13:24:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jgy2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
轰隆隆: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢，那我降低浓度再试试 2013-08-02 16:00:51
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来！ 2013-08-02 16:20:45
当然了，荧光检测器灵敏度相当高了，理论上最低限能达到10的-12次幂ug/ml，你那个也就5ug/ml，远远高于其检测能力
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6楼2013-08-02 15:58:53
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woniubaby

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
轰隆隆: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-08-05 11:02:29
小杂峰出现的原因可能有：1，配置样品的溶剂不干净，用HPLC 级的溶剂配置样品；2，进样阀/针污染，彻底清洗一下进样阀/针；3，柱子污染，用高比例有机相冲洗柱子，然后充分平衡。那个大峰平头的原因是超载，你用的是荧光检测器，灵敏度一般都比紫外高3个数量级，所以要充分稀释后进样，应该就可以了
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Doing what you like is freedom, liking what you do is happiness.
9楼2013-08-05 07:53:50
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普通回帖

akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
轰隆隆: 金币+5, ★★★很有帮助, 可是配的浓度不高啊，1.1mg/25ml,进样量20微升。 2013-08-02 13:44:01
5分钟的峰确定不是主成分峰？从图上看这个超载太多了，所以稀释后才会变成尖的

那几个包可能是一些较强保留的物质或者气泡，可以用梯度洗脱看看是否有保留强的物质在
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
2楼2013-08-02 13:36:18
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lkqzpp

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
轰隆隆: 金币+5, ★★★很有帮助, 该如何解决呢？ 2013-08-02 13:44:41
检测器有污染，或有气泡
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互帮互助，共同进步
3楼2013-08-02 13:38:34
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jgy2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
轰隆隆: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-02 15:40:47
进样浓度太大了，主峰过载都平头了，你放大坐标自然杂质很多导致基线不稳
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4楼2013-08-02 14:08:45
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轰隆隆

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jgy2000 at 2013-08-02 14:08:45
进样浓度太大了，主峰过载都平头了，你放大坐标自然杂质很多导致基线不稳

荧光检测器这么灵敏吗？20微升里面标准品含量大概也就100纳克。。。。还是太高了吗
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鸟儿大了，什么林子都有！
5楼2013-08-02 15:40:40
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轰隆隆

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jgy2000 at 2013-08-02 14:08:45
进样浓度太大了，主峰过载都平头了，你放大坐标自然杂质很多导致基线不稳

可我用的是标准品，怎么会杂质很多呢
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鸟儿大了，什么林子都有！
7楼2013-08-02 16:32:29
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刘水兵

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
轰隆隆: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-08-05 11:02:16
1.首先请冲洗柱子，基线一定要平稳，然后将要进样稀释到合适的浓度，浓度太高了所以平头
2.如果你的方法是走梯度的话，基线有点漂移是正常的，如果有明显的峰，可以检测下是否是溶剂里面的。
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知识永远是源动力！！
8楼2013-08-03 09:41:55
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shandaminmin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

基线问题是你纵轴范围??，把第一张的纵轴拉??，也是如此

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
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10楼2013-08-05 16:20:12
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