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酵母表达蛋白在发酵时降解了
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lifuzhu3838
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专业: 临床免疫学检验
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]
酵母表达蛋白在发酵时降解了
我有个构建好的酵母,小试表达蛋白约为8mg/L,然后就上10L的发酵罐。正常来说,因为发酵罐菌密度比小试的能增加10倍,那就能得到8mg/L*10*10L=800mg的目的蛋白。可是发酵只得到了70mg!!
酵母诱导的时候有一段营养真空期,可能会死一些菌,就会分泌一些蛋白酶,我这蛋白的结构比较松散,现在就怀疑是发酵的时候被蛋白酶降解了,但是也不知道怎么确定!!然后确定了,我又该怎么办呢?求虫友帮忙啊
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1楼
2013-08-02 12:34:38
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注册: 2013-07-17
性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
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laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助!
2013-08-03 22:50:07
lifuzhu3838: 金币+2,
★
有帮助
2013-08-04 00:47:23
你不能根据小试和发酵罐的比较来确定你的蛋白真被降解了,因为两个系统完全不同,发酵条件不同,对其蛋白表达必然有所影响。除非你发现蛋白量随着发酵时间增加,然后又降低了。想提高表达量,个人觉得你可以优化一下发酵条件,good luck!
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互助互励,共奋共进!!
3楼
2013-08-03 21:11:04
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lifuzhu3838
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虫号: 1472777
注册: 2011-11-02
性别: GG
专业: 临床免疫学检验
求大神啊,最近实验来不及了,心急如焚
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活到老学到老
2楼
2013-08-02 15:36:19
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