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BDNF的转膜条件(湿转)
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懋懋4444
银虫
(初入文坛)
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虫号: 1549955
注册: 2011-12-24
专业: 中药神经精神药理
[
求助
]
BDNF的转膜条件(湿转)
各位大神,紧急求助,BDNF15kd左右的weston blot 转膜条件是什么?
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1楼
2013-08-01 21:21:23
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jiang701820
银虫
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虫号: 1943252
注册: 2012-08-17
专业: 心脏结构与功能异常
【答案】应助回帖
转膜确实没啥特别的,我们平常都是200mA(2块胶)湿转90min,10-170kda的都没有任何问题,你如果要纠结的话,15kDa转60min也足够了,只要marker都转到膜上了应该转膜就是成功的,祝好运
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4楼
2013-08-05 10:13:52
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lubuddy
铁杆木虫
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虫号: 669107
注册: 2008-12-06
专业: 神经生物学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
我觉得转膜条件没有很关键的地方啊。
就是你按照标准的protocol配液,然后用NC膜80V左右转一个小时应该没问题的
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2楼
2013-08-02 00:51:54
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yubingying
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虫号: 1094272
注册: 2010-09-09
性别:
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专业: 中药神经精神药理
【答案】应助回帖
我用的是伯乐的转印槽,300mA,湿转80-100分钟,转膜液按常规配。个人觉得关键是BDNF抗体要好,一次就可以做出来。没有什么特殊的
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今天不努力,明日徒伤悲
3楼
2013-08-05 09:11:12
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