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tcmtc

铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞药理学的问题请教药理行家 已有2人参与

我想做几个化合物的抗肿瘤活性,实验方案这么写的:,
1、体外细胞毒实验:采用四氮唑盐酶还原法(MTT)测定抗肿瘤的生物效应。接种肿瘤细胞数10000-100000,设置空白对照和阳性对照(羟基喜树碱,HCPT),并分析其量效关系;
2、细胞周期实验:通过流式细胞术(Flow cytometry, FCM)DNA含量分析,检测不同剂量化合物对瘤株(根据体外细胞毒实验结果确定瘤株,下同)的影响;
3、细胞调亡试验:通过荧光显微镜观察(Hoechst染色试剂盒)、DNA片断琼脂糖凝胶电泳和FCM DNA的TUNEL法等检测不同剂量化合物对肿瘤细胞凋亡的影响;


我不是学药理学的,上面是我参考他人写的,所以我不晓得对不对,或者方法太陈旧,请大家指正!

[ Last edited by tcmtc on 2013-8-3 at 12:43 ]
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艾叶米虫

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1:MTT,96孔板每孔只需要铺 8000细胞即可。96孔板最外用PBS封板。设置一组空白对照为只加细胞不加药。设置一组阴性对照为只加培养基不加细胞。
2:细胞周期实验是采用PI试剂盒进行细胞处理,之后用流式细胞仪分析药物对细胞周期的作用。
3:细胞凋亡实验无需这样麻烦,从流式细胞周期图中即可检测到凋亡。
3楼2013-10-09 13:39:44
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liankeqiye

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

2楼2013-08-07 20:03:40
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tcmtc

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 艾叶米虫 at 2013-10-09 13:39:44
1:MTT,96孔板每孔只需要铺 8000细胞即可。96孔板最外用PBS封板。设置一组空白对照为只加细胞不加药。设置一组阴性对照为只加培养基不加细胞。
2:细胞周期实验是采用PI试剂盒进行细胞处理,之后用流式细胞仪分析 ...

谢谢!
4楼2013-10-15 21:16:13
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