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hiyellow银虫 (初入文坛)
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[求助]
puromycin筛选细胞的问题
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| 之前我往HeLa里转染了一个带puromycin抗性的质粒，然后就用加了puromycin的培养基养着，开始几天死了一些细胞，后来到现在都已经过了一个半月了，怎么细胞都还是长得好好的呢？本来担心是我的puromycin失效了，所以用这个培养基换液到的野生HeLa，差不多四天这些野生HeLa就都死了。那我之前转染的细胞怎么会这样呢？是转染的质粒还没降解吗？ |
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hiyellow
银虫 (初入文坛)
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3楼2013-07-30 16:14:27
gyesang
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amisking: 金币+3, ggod 2013-07-30 18:35:51
hiyellow: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 单独交流过了，有很大帮助，非常感谢 2013-07-31 15:40:06
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转染了一个带puromycin抗性的质粒，然后就用加了puromycin的培养基养着，开始几天死了一些细胞，后来到现在都已经过了一个半月了，细胞当然还是长得好好的，因为你转染了抗puromycin的质粒啊，到现在一个半月了，细胞不死，说明你筛出了稳定株，你的这个质粒在puromycin持续筛选的压力下整合到染色体上去了哈， 此外，不知道你实验的目的是什么，转质粒用puromycin筛选不就是要筛选出抗puromycin的细胞吗？ |
2楼2013-07-30 15:54:38
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