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崔永霞铁虫 (小有名气)
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[求助]
如何减少引物二聚体
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| 各位高手，这几天我做的PCR，目的条带很弱，但是引物二聚体很强，各位高手有没有能有效的减少引物二聚体的方法？我试着减少了引物的用量，但引物二聚体还是很强。郁闷，求各位高手指点！ |
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07bio
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大意是描述一种方法，可以消除引物二聚体的积累 These observations led to the hypothesis that a system could be developed whereby the accumulation of PDs in a PCR may be eliminated 具体方法是在引物的5‘端加入一段寡核苷酸序列 We demonstrate a method for the general suppression of PD formation that uses a sequence of additional nucleotides (a Tail) at the 5′ ends of amplimers. 文章太长，不可能帮你翻译，自己看吧。 另外，针对你的问题可以先用高浓度的模板做看看，不行再做退火梯度。 引物该怎么设计，这个网上一搜一大堆。 |
17楼2013-07-29 17:08:11
2楼2013-07-28 12:36:59
3楼2013-07-28 14:58:50
07bio
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【答案】应助回帖
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-28 16:02:11
崔永霞: 金币+1, ★有帮助 2013-07-28 18:25:25
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崔永霞: 金币+1, ★有帮助 2013-07-28 18:25:25
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给你篇文献自己看下 Brownie J, Shawcross S, Theaker J, Whitcombe D, Ferrie R, Newton C, Little S. The elimination of primer-dimer accumulation in PCR. Nucleic Acids Res 1997; 25:3235-3241 |
4楼2013-07-28 15:16:27