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jue9958

新虫 (小有名气)


[交流] 第一次提RNA,跑胶如图,求告知结果如何。。。

求指教啊。
第一次提RNA,跑胶如图,求告知结果如何。。。
跑胶图。.jpg
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longrna

新虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩 2013-07-27 22:18:35
jue9958: 金币+1 2013-07-28 09:01:59
胶孔太小,上样有点多,电泳时间过久。
难以判断是跑胶过程造成的降解还是提取时就降解了。
鉴于说是第一次提,总的来说,勉强合格。
2楼2013-07-27 14:57:09
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Sthunder

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩 2013-07-27 22:18:47
jue9958: 金币+1 2013-07-28 09:02:03
有明显降解,但做一般反转录足够!Good luck!
4楼2013-07-27 21:25:48
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
jue9958: 金币+1 2013-07-28 09:02:06
从条带上看有明显降解,但可能是电泳时间过长造成的。跑RNA要尽量缩短电泳时间,电泳缓冲液要新配置。样品里含有少量蛋白污染。
5楼2013-07-27 23:19:46
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普通回帖

jdseeker

银虫 (小有名气)


比较烂,个人觉得
3楼2013-07-27 15:32:13
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jue9958

新虫 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-27 23:19:46
从条带上看有明显降解,但可能是电泳时间过长造成的。跑RNA要尽量缩短电泳时间,电泳缓冲液要新配置。样品里含有少量蛋白污染。

知道了,谢谢大神。
有事还要召唤你哦。
6楼2013-07-28 09:01:18
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jue9958

新虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by Sthunder at 2013-07-27 21:25:48
有明显降解,但做一般反转录足够!Good luck!

知道了,谢谢大神。
有事还要召唤你哦。
7楼2013-07-28 09:01:29
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jue9958

新虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by longrna at 2013-07-27 14:57:09
胶孔太小,上样有点多,电泳时间过久。
难以判断是跑胶过程造成的降解还是提取时就降解了。
鉴于说是第一次提,总的来说,勉强合格。

知道了,谢谢大神。
有事还要召唤你哦。
8楼2013-07-28 09:01:39
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jue9958

新虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by jdseeker at 2013-07-27 15:32:13
比较烂,个人觉得

哈哈。是呢么。。。第一次。确实啥都不会。
求告知如何烂。虚心求教呢。
9楼2013-07-28 09:02:50
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
基本都降解了,除了那三个亮一些的勉强可以做后面的实验之外,其他的都不行!
10楼2013-07-28 22:57:41
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lafy

新虫 (初入文坛)


有降解,建议重提。
11楼2013-08-06 12:42:04
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漂_浮

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以反转后跑胶  毕竟RNA太容易降解
12楼2013-08-06 14:54:28
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mmz123250

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
从图片看:
1、电泳时间太长(marker中最大的条带都跑那么远了),降解偏重。
2、提取过程中,防降解措施未做充分。比如枪头、1mltube管浸泡不充分,提起时操作缓慢、未戴口罩,离心机降温效果不好等等,都可能导致RNA降解
3、所提RNA含蛋白杂质。提取可能离心不充分,分离蛋白等操作不够严谨。
13楼2013-08-06 17:19:05
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