24小时热门版块排行榜    

查看: 2552  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

306495799

铁虫 (小有名气)

[求助] RNA提取电泳效果不好

细胞提取的RNA(五个条带),结果图很不理想,组织提取的RNA(两个条带)也是一样,5s前面还有一条很亮的条带,不知道原因在哪里?求论坛高人指点
RNA提取电泳效果不好
20130723rna.JPG


RNA提取电泳效果不好-1
20130722rna.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

也许似乎大概是,然而未必不见得
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

306495799

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by lmcyjxs at 2013-07-24 16:27:13
应该是有DNA污染的,这个看上去不像是制胶的问题,当然不反对有这个因素,另外,我也想提几个问题,希望可以一起探讨下:
  1 有些泳道,我看也不像降解,比如第一个图的第四五个样品,从亮度比例看,质量是不错, ...

测了浓度,都达到了2ug/ul,但是A260/280才1.77~1.9,A260/240才1.4~1.8,制胶有点急了,还没有完全凝好我就点样跑电泳了。
也许似乎大概是,然而未必不见得
10楼2013-07-24 21:39:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

lmcyjxs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
306495799: 金币+40, ★★★很有帮助, 过程要在冰上放置吗?加入异丙醇是不是要轻轻颠倒混匀啊? 2013-07-24 09:30:30
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助! 2013-07-24 11:08:39
你的每个样品主要是有DNA的污染,你的是什么方法提的?试剂是不是自己配的?酚氯仿抽提液是你自己配的吗?如果是,注意酚要选水饱和酚。
1 你在每次取上清的时候,不要取到中间层,宁愿取少点,够用就行。看的图虽然有DNA污染,但是量是很丰富的。DNA也是溶在水相的,只是在靠近中间层那里。
2 电泳上样量不知你上多少,从第一个图的第一个条带来看,稍大了点,其他基本还好。
3 至于为什么这么多条带,我一时没有想明白,我觉得可能你在提取过程中,震荡过于剧烈造成的,不过这点不确定,你尝试着有些步骤不要振荡太剧烈,以免机械剪切力造成条带断裂。
4 出现这么多条带,还有可能是降解了。你操作过程中尽量注意环境卫生、温度把控,另外提取时,细菌的量不要太多,太多也会易降解的。
祝好!
思路决定出路。。。
2楼2013-07-23 18:36:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢开龙

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
306495799: 金币+10, ★★★很有帮助, 看一下我的前期提取过程有什么问题吗? 2013-07-24 09:31:16
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-24 11:08:49
引用回帖:
2楼: Originally posted by lmcyjxs at 2013-07-23 18:36:56
你的每个样品主要是有DNA的污染,你的是什么方法提的?试剂是不是自己配的?酚氯仿抽提液是你自己配的吗?如果是,注意酚要选水饱和酚。
1 你在每次取上清的时候,不要取到中间层,宁愿取少点,够用就行。看的图虽 ...

个人认为,最容易使RNA降解的步骤是磨样的时候。一定保证加入第一次加入溶液前,组织处于冰冻状态。
3楼2013-07-24 00:13:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmcyjxs

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 谢开龙 at 2013-07-24 00:13:05
个人认为,最容易使RNA降解的步骤是磨样的时候。一定保证加入第一次加入溶液前,组织处于冰冻状态。...

你说的对,这点也很重要。
思路决定出路。。。
4楼2013-07-24 00:18:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见