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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求教qPCR反应液如何才能混合均匀？
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elise1987

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1.加样前的混匀很重要，一般情况下，qPCR会做2~3个复孔，这个时候将这些所有的预混液都混匀，用一般的离心机就是八连管离心机离心后再分装。这样就很均匀。如果没有专用离心机，就事先按比例多混一点用合适的枪头反复混匀后，吸取非气泡部分再分装，这时候不要怕浪费，如果试验出差错浪费更多。
2.分装的时候动作尽量轻，放慢一点不要紧，枪头沿着接近罐底部的管壁打下去，一般液体都会顺着管壁到管底。反应开始前可以检查一下，如果还是有气泡轻轻用手指弹一下，气泡就会飘到页面不久后就消失，即使不马上消失应该也没关系，经验告诉我，页面上的这种气泡影响不会很大，三个复孔之间的差距很小，猜想是高温是气泡立马就破掉了。
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apparitioncc
不折腾，不胡闹，珍惜时间和生命
11楼2013-07-24 21:58:25
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apparitioncc

铜虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by elise1987 at 2013-07-24 21:58:25
1.加样前的混匀很重要，一般情况下，qPCR会做2~3个复孔，这个时候将这些所有的预混液都混匀，用一般的离心机就是八连管离心机离心后再分装。这样就很均匀。如果没有专用离心机，就事先按比例多混一点用合适的枪头反 ...

很详细，非常感谢！
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12楼2013-07-25 09:06:41
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