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铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:

10楼: Originally posted by wklinyi at 2013-07-25 11:07:46
做了正对照了。感受态是自己做的。我转17pg空质粒时，长出来88个菌落。...

找不到问题就再重新切连转。我很怀疑为什么切空载体连接转化会不成功。只要两个酶的用量合适，应该可以完全切开。只要每一步都仔细按量做，应该没有问题的。

11楼2013-07-25 11:53:25

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至尊木虫 (著名写手)

感谢参与，应助指数 +1

看到以上的回复，楼主从以下两个个方面的考虑：
1 你的hind III是否是作为上游酶切位点，如果是上游你要考虑连接之后的序列会不会发生移码突变？
2 在涂平板的时候，你的抗生素是如何加的。抗生素一般在配置固体培养基时就要加。此前我有一个同事是把抗生素涂在平板上的，菌落一直不长

12楼2013-07-25 12:51:45

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