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sars37

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[求助] 转化后细菌提质粒，PCR条带很诡异

从板上挑的菌落都长的不是很好，基本上就只有几个菌落，挑完接种提质粒后PCR，发现条带只有100bp，目的基因有1000bp左右，而且还加了myc，为什么PCR之后就只有100bp了呢？

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1楼 2013-07-22 17:26:10

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sars37

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引用回帖:

12楼: Originally posted by lwiaanngg at 2013-07-23 21:08:24
第一，重复几次实验不代表你做的方式是正确的，先不要再重复了，好好分析一下你拿到的数据。
第二，你酶切的实验做过么？先看看你挑出的那几个菌落，即使是空载，确保载体是正确的，如果不对，长出来的就是一些污 ...

恩，反复想了下，估计还是我回收的浓度太低，没有连接好，我回收用的是QIAEXII这个试剂盒，回收的浓度比较低，是如果要回收这个胶里的DNA，我听说做的这个胶是要用EDTA调过的TBE来做吗？调到多少PH呢？