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wendell13

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 兽医传染病学

[求助] 新人，请大侠赐教：构建重组质粒选择双酶切还是单酶切？

初次构建：
已排出了目的基因上已有的酶切位点
也查明多克隆位点上有好几个酶切位点可选择
疑惑该选单酶切还是双酶切？？

理论上单酶切不是比双酶切更简单么，为什么我看到网上众多的构建质粒都是采用双酶切，单酶切构建却比较少见到。。
问了实验室师姐答曰大家都是采用双酶切构建的。。晕

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1楼2013-07-18 12:04:21

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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-20 11:49:49

当然是首选双酶切，因为不用考虑插入方向问题，载体自连也没这个情况。除非没有选择才选择单酶切，比如某个酶很贵，或者目的片段上有某个酶切位点，实验设计好，做克隆会省心很多~

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Only the strong survive.

14楼2013-07-19 21:13:06

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