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履霜木虫 (正式写手)
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[求助]
免疫荧光染色，western blot均有目的蛋白，但是RT-PCR总是没有条带
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 如题了，大家帮忙想想了，这个蛋白是和脂肪代谢有关的，卵母细胞上面的。 |
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 核酸生物学实验经验 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
1949stone: MolEPI+1, 学习下 2013-07-18 07:52:33
履霜: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2013-07-18 08:12:26
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1949stone: MolEPI+1, 学习下 2013-07-18 07:52:33
履霜: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2013-07-18 08:12:26
如果是卵母细胞的话，那很好解释。当然前提是你的rtpcr实验结果是靠得住的 。MII期的卵母细胞中积累了许多母源性的mRNA和蛋白，为受精到合子基因激活（ZGA）这段时间支持胚胎的发育。因为这段时期受精卵中雌雄原核正在不断接近而重新形成2倍体，形成后还要经历表观遗传修饰的过程，所以合子基因组是不或极弱表达的，胚胎所有的活动都需要靠母源性mRNA翻译为蛋白以及已有蛋白去完成（现在发现好像还有小RNA什么的），mRNA的翻译、降解及蛋白的降解都是受到非常严格的调控的。 一般情况是可以检测到mRNA，但是却没有这种蛋白。楼主的情况比较少见，有蛋白而没有mRNA，说明这种蛋白对于卵母细胞是非常重要的，但是受精后（至少在ZGA之前）却并不需要或者不再多需要，所以没有它的mRNA储存。这是非常有趣的，好好做吧，也许可以出好文章。到时候要多给我金币昂  斑竹，这回可以给个EPI了吧？已经写了这么多，讲的这么详细了。非专业虫子也应该能看懂了。 |
4楼2013-07-17 23:41:58
6楼2013-07-18 08:46:44