| 查看: 4129 | 回复: 19 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[求助]
如何使大肠杆菌表达的时候不产生包涵体
|
||||
| 我在用大肠杆菌表达乙酰酯酶，但是表达出来后收集菌液超声波不能超开，分析可能是形成了包涵体，求助大神帮忙，如何才能表达出目的蛋白而不产生包涵体 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生化实验经验积累 | 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有298人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 怎么使大肠杆菌产生更多的臭味
已经有9人回复
- 蛋白表达不出来，是什么原因造成的
已经有7人回复
- 求助：哪些类蛋白在大肠杆菌中不好表达？
已经有9人回复
- 我的蛋白在大肠杆菌中表达量低怎么办？
已经有7人回复
- 有人知道大肠杆菌中的外源蛋白最大表达量吗
已经有6人回复
- 大肠杆菌BL21菌株表达目的蛋白时，菌液破碎前后的浑浊程度变化很不明显
已经有5人回复
- 大肠杆菌表达42kd的蛋白，蛋白电泳显示只有35kd，测酶活还比较高，这是怎么回事儿呢？
已经有9人回复
- 求助！大肠杆菌转化不长菌落~
已经有28人回复
- 大肠杆菌超声破碎很久不见澄清仍是白色的
已经有21人回复
- 大肠杆菌组成型表达载体
已经有8人回复
- 大肠杆菌表达蛋白提取总不成功，求助高手指教！
已经有5人回复
- 大肠杆菌基因重组时PKD46高温怎么都消除不了
已经有25人回复
- 大肠杆菌如何产生抗药性？
已经有9人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？
已经有28人回复
- 【求助/交流】外源基因在大肠杆菌中表达的问题？
已经有5人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌摇菌时长时不长
已经有24人回复
- 【求助/交流】蛋白酶在大肠杆菌表达在牛奶平板上有透明圈，液体诱导却无酶活
已经有5人回复
9楼2013-07-17 16:39:26
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-07-17 00:07:58
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2119.9
- 散金: 10
- 红花: 209
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-07-17 00:52:46
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-07-17 00:52:46
| 防止包涵体出现常用的方法：1.降低重组菌的生长温度是防止包涵体出现最常用的方法。低生长温度降低了无活性的聚集体的形成的速率和疏水相互作用；细菌生长缓慢溶氧水平降低，也可以减少包涵体的形成。2.在培养重组菌时提供丰富的培养，创造最好的培养条件，如：供氧充足、合适的pH值等，以减少包涵体的形成。3.添加可促进重组蛋白质可溶性表达生长添加剂，增加细胞的渗透压。4.在低浓度的诱导剂条件下培养重组菌，减少重组蛋白质的表达量，也可减少包涵体的形成。5.利用硫氧还原蛋白融合表达或与目标蛋白质共表达，得到可溶性的蛋白质。6.筛选合适的宿主菌，使表达的重组蛋白质可溶。7.与目标蛋白质共表达某些能够在目标蛋白质折叠过程中起作用的分子伴侣，得到得到可溶性的蛋白质。 |
3楼2013-07-17 00:38:19
4楼2013-07-17 09:14:16
30