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菌液PCR
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| 大家好！最近做菌液PCR的时候，P出来结果是ddH2O里面都能P出引物二聚体，没有目的条带，引物是之前设计好的，没有问题，反应体系和条件也是按照之前师姐的方法不变，之前都能P出条带来，但之前没有做过菌液PCR,请问各位大虾有木有懂的，教教我是哪里出了问题啊？、 |
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5楼2013-07-17 08:51:07
【答案】应助回帖
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-16 17:32:52
libra小朵: 金币+5 2013-07-18 18:33:44
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libra小朵: 金币+5 2013-07-18 18:33:44
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希望对你有帮助： 你为什么还要用菌液做PCR？你还不如摇菌后提取质粒然后用质粒PCR。 我觉得菌落PCR效果很好，虽然有假阳性的可能，但是只要是做出来，有目的条带一般是对的。 关于没有目的条带，我觉得很有可能是你的质粒被稀释了，因为在菌落中的浓度比较大；另外也有可能是你根本就没有挑到正确的菌落来摇菌，所以就没有产物。 再就是的能确定是引物的二聚体么？你是否是从单一的聚落挑出来的？ |
2楼2013-07-16 16:43:53
3楼2013-07-16 17:28:11
cicelyzh
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4楼2013-07-17 04:12:59
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