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化学521

新虫 (正式写手)

[求助] SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳成像结果的若干问题

我做了一个蛋白质SDS聚丙酰胺凝胶电泳,但是结果很丑,想请各位帮忙分析一下。第二道是我用2M硫酸铵盐析蛋白质沉淀以后的上清液5ul,第三道是上一步的蛋白质沉淀用1M硫酸铵溶解后的上清液5ul,第四道是1M硫酸铵未能溶解的沉淀加了等量水溶解5ul;第五道样品同第二道但上样量10ul,第六道同第三道10ul,第七道同第四道10ul;
(1)第五道变胖是因为第四道蛋白浓度太低了吗
(2)第六道弯曲是因为盐度太高了吗还是被第五道更高盐度影响了
(3)题外话:beta-巯基乙醇,尿素,盐酸胍三者分别作变性剂的区别在哪里,对电泳结果成像有何影响
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳成像结果的若干问题
2013-07-13 15hr 37min.jpg
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lim1896

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

制备分离胶和浓缩胶时,试剂一定要混匀,尤其是在加完TEMED之后,如果量少不好摇晃,可以用枪搅,就像打鸡蛋那样,多混一下,胶的效果会好一些,不然,容易跑成“山水画”
7楼2013-07-17 10:55:14
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