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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 链霉菌 接合转移500金币求助
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

[求助] 链霉菌 接合转移500金币求助

我做链霉菌的接合转移已经有将近2年时间，方法是链霉菌遗传操作手册上的，并阅读文献进行改进。我几乎读遍了所有的关于这方面的文献，做了无数次尝试及实验条件优化，目前为止从未出现任何接合子，从未成功。
我在论坛里面也看了很懂做这方面工作的帖子，每次都在做不同的尝试，依然没有成功。
希望有经验的同学给以指导。一旦成功，愿意奉送高额金币。
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1楼2013-07-13 10:04:15
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by kingsoo at 2013-07-15 13:27:08
你用的质粒是哪种？接合转移这种方法有效克服宿主对外源DNA的限制性修饰。不同链霉菌的最优条件不同，我可以把我之前优化的条件给你做参考。
受体：孢子热激后预萌发
取适量孢子悬液，直接50°C水浴热激10min，待 ...

复制型pJTU1278，pUWL201和整合性的pSET152质粒都用过。您用的什么质粒？
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17楼2013-07-16 15:37:56
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把你的链霉菌培养到平板，我实验室有相关设备可以为你做结合，有需要的话，回复我。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-07-13 18:01:32
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiyannangxj at 2013-07-13 11:01:32
把你的链霉菌培养到平板，我实验室有相关设备可以为你做结合，有需要的话，回复我。

多谢！
是这样的我们这个菌株还未公开，算是专利。。。。。并非我不信任您。
您说有做接合转移的设备？这个还需要什么设备吗？能否给我一份贵实验室详尽的实验步骤，包括细节？
感谢您的回复，如果可以成功我给您500金币，说道做到。如果不方面的话我邮箱是lanyuekun@163.com，希望您能帮助！
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3楼2013-07-13 20:39:33
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝月望宁 at 2013-07-13 20:39:33
多谢！
是这样的我们这个菌株还未公开，算是专利。。。。。并非我不信任您。
您说有做接合转移的设备？这个还需要什么设备吗？能否给我一份贵实验室详尽的实验步骤，包括细节？
感谢您的回复，如果可以成功我给 ...

不好意思啊，我们实验室实验步骤是长期积累的经验，属于课题组的内部机密，我们实验室已经为外人做过好多次了，有偿结合，技术不外传的，请原谅！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-07-13 23:37:52
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