应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Native-PAGE技术请教
71/1返回列表
查看: 2652  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhangbaocau

新虫 (小有名气)

[求助] Native-PAGE技术请教 已有1人参与

从左边到右边依次是2个真菌胞内可溶全蛋白、Marker，分离胶，3%-15%梯度胶，
请问大家，我跑Native-PAGE与SDS-PAGE在操作上、配方基本上是相同的，只是配方、上样缓冲液等都去掉了SDS、 疏基乙醇（样品处理也未加热），但Native-PAGE明显跑的不好，连Marker都没跑出来，求高手指点，谢谢！
其中下图SDS-PAGE10%分离胶，4%浓缩胶，
Native-PAGE技术请教
Native-PAGE


Native-PAGE技术请教-1
SDS-PAGE
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-12 11:28:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-12 11:51:49
这很正常，native-page没有SDS增加蛋白表面的负电荷，蛋白只有靠自身携带的电性往正极跑，所以速度比较慢，而且条带没有变性胶漂亮。至于marker为什么不好我不是很清楚。可能marker的蛋白中有些是碱性蛋白，所以不往下跑？
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-12 11:49:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangbaocau

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-12 11:49:08
这很正常，native-page没有SDS增加蛋白表面的负电荷，蛋白只有靠自身携带的电性往正极跑，所以速度比较慢，而且条带没有变性胶漂亮。至于marker为什么不好我不是很清楚。可能marker的蛋白中有些是碱性蛋白，所以不往 ...

哦，谢谢，请问Native-PAGE一定要恒流吗？？SDS-PAGE一般是恒压（80V，120V）
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-12 16:31:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangbaocau

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-12 11:49:08
这很正常，native-page没有SDS增加蛋白表面的负电荷，蛋白只有靠自身携带的电性往正极跑，所以速度比较慢，而且条带没有变性胶漂亮。至于marker为什么不好我不是很清楚。可能marker的蛋白中有些是碱性蛋白，所以不往 ...

另外，第3道marker应该是酸性蛋白，往下（正极)跑的，只是没跑开啊，不知道是不是因为胶的梯度浓度太低了？？
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-12 16:34:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
zhangbaocau: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-14 19:04:56
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangbaocau at 2013-07-12 16:31:27
哦，谢谢，请问Native-PAGE一定要恒流吗？？SDS-PAGE一般是恒压（80V，120V）...

不一定恒流。跑胶用恒压或者恒流主要看操作方便和个人习惯。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-07-12 23:07:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
zhangbaocau: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-14 19:05:06
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangbaocau at 2013-07-12 16:34:23
另外，第3道marker应该是酸性蛋白，往下（正极)跑的，只是没跑开啊，不知道是不是因为胶的梯度浓度太低了？？...

native-page跑起来很慢的，因为电荷少。看你要分的蛋白在什么位置了。你可以适当延长跑胶时间。
赞一下 回复此楼
6楼2013-07-12 23:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

深爱小李

禁虫
本帖内容被屏蔽
7楼2021-12-02 20:51:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhangbaocau 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+7 David1982 2026-10-13 11/550 2026-10-15 10:30 by zyqchem
[职场人生] 40+中年人失业后，还能找到好工作吗？ +5 xqy2009 2026-10-13 5/250 2026-10-15 09:49 by 淘淘塑物性通
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭