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still2008

至尊木虫 (著名写手)

破碎世界的守护者

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-12 17:15:52

1、跑个电泳，确定模板没问题
2、根据自身的实验，确定扩增循环参数，文献作为参考，以自己的为准。
3、确定体系里的每一种成分都没坏（当然，这种情况极少）

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有时一本正经，有时胡言乱语。

21楼2013-07-12 15:47:49

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grape_vine

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

20楼: Originally posted by sycr at 2013-07-12 15:29:19
哦，这个问题没有仔细的想过，我是新手，请问循环数对PCR的影响也很大吗？...

你现在不是看到不到东西吗? 除了大家说的那些原因,循环数对你用的那个32的可能影响不大,但是有可能28的那个你用了35就可以看到了.所以做不出来的时候,可以斗勇35,等做出来了,再减循环数也行.更多的循环会增加扩增量,但是也会引入更多的错配.

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22楼2013-07-12 16:20:15

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sycr

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

22楼: Originally posted by grape_vine at 2013-07-12 16:20:15
你现在不是看到不到东西吗? 除了大家说的那些原因,循环数对你用的那个32的可能影响不大,但是有可能28的那个你用了35就可以看到了.所以做不出来的时候,可以斗勇35,等做出来了,再减循环数也行.更多的循环会增加扩增量 ...

哦，十分感谢，我再去试试。

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23楼2013-07-12 16:22:28

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