24小时热门版块排行榜    

查看: 4596  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

飞鸟and唐山

铜虫 (初入文坛)

[求助] 请教内切酶的不同U是什么意思?酶切时对用量有什么影响?

分子新手请教
我刚从上海生工定的两个酶,XhoI和BglII。它俩的包装规格分别是2000U和500U,不知道这对酶切时的用量是什么?
能说下双酶切的话具体加多少吗?我看我们实验室用的都是20uL的体系。
回复此楼
加油!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 飞鸟and唐山 at 2013-07-11 10:17:35
您好,请问酶切时间的话具体要怎么确定啊?我查的推荐buffer里,两个酶一个是百分之100,一个是50-100,时间的话应该是多少呢?...

我个人觉得可以酶切过夜。
11楼2013-07-11 10:42:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
飞鸟and唐山(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-10 20:35:51
这个单位是总量,你需要看看每ul的U是多少。我做实验的话一般双酶切切3ug的质粒的话会加1.5ul的酶。酶切时间的话,你要查一下这两个酶在buffer里的活性。
2楼2013-07-10 19:16:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 正解! 2013-07-12 01:41:00
U是酶活单位,具体看产品说明的定义。
为什么
3楼2013-07-10 21:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飞鸟and唐山: 金币+2, 有帮助 2013-07-11 09:49:41
gyesang: 金币+2, 鼓励应助!解决楼主问题 2013-07-12 01:41:30
U是酶活力单位,指在37°C作用1小时完全切割1μg λ DNA的酶量为1U。包装规格说的是酶的总活力,你还要看酶的浓度为多少U/μl。20μl酶切体系一般切质粒/DNA1μg,加10U切1-3小时。
4楼2013-07-11 07:16:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 13:08 by winsaint
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +10 Kittylucky 2026-08-27 11/550 2026-08-28 10:45 by Kittylucky
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金不中,共勉 +10 eulota 2026-08-26 10/500 2026-08-27 17:23 by lqllinqiaoli
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
信息提示
请填处理意见