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目的基因连T载体能连上,双酶切后连不上HTB质粒,都三个月了,纠结啊。。。
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| 我的目的基因1450左右,HTB质粒4856bp,双酶切的酶sal Ⅰ,xho Ⅰ, |
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6楼2013-07-17 10:30:09
yb19841014
铁杆木虫 (著名写手)
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2楼2013-07-10 19:19:32
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
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blueghost2: 金币+2, ★有帮助 2013-07-17 13:15:54
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1.可能是目的基因片段太长了,导致连不上,可查阅此目的基因的相关资料,证实一下看是不是这个原因 2.可能是HTB质粒与目的基因不合适,可查阅HTB质粒的适用条件,再考虑要不要换连接质粒 3.可能是双酶切的酶有问题,可能是双酶切的两个酶切位点隔得很近,导致制切了一个位点,另一个没切成功,导致连不上;也可能是双酶切的缓冲液有问题,看它们所用缓冲液是否都适合两种酶酶切。 |
3楼2013-07-10 20:25:34
4楼2013-07-10 23:07:26










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