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目的基因连T载体能连上，双酶切后连不上HTB质粒，都三个月了，纠结啊。。。
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| 我的目的基因1450左右，HTB质粒4856bp，双酶切的酶sal Ⅰ,xho Ⅰ, |
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 分析的很好！ 2013-07-11 01:08:26
blueghost2: 金币+2, ★有帮助 2013-07-17 13:15:54
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blueghost2: 金币+2, ★有帮助 2013-07-17 13:15:54
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1.可能是目的基因片段太长了，导致连不上，可查阅此目的基因的相关资料，证实一下看是不是这个原因 2.可能是HTB质粒与目的基因不合适,可查阅HTB质粒的适用条件，再考虑要不要换连接质粒 3.可能是双酶切的酶有问题，可能是双酶切的两个酶切位点隔得很近，导致制切了一个位点，另一个没切成功，导致连不上；也可能是双酶切的缓冲液有问题，看它们所用缓冲液是否都适合两种酶酶切。 |
3楼2013-07-10 20:25:34
yb19841014
铁杆木虫 (著名写手)
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2楼2013-07-10 19:19:32
4楼2013-07-10 23:07:26
5楼2013-07-15 16:06:11