24小时热门版块排行榜    

查看: 4104  |  回复: 9

duoduozuo

新虫 (小有名气)

[求助] 用考马斯亮蓝法测定蛋白时,浓度出现负值是什么原因??急求助

用考马斯亮蓝测定蛋白浓度时,浓度出现负值,急求各位大牛指点一下!我的空白样没问题,我在加考马斯亮蓝到样品中时,发现滴少量考马斯亮蓝到样品中时,溶液出现蓝色,但是接着加至5ml时,溶液的蓝色消失了,取而代之的是一种棕色。测定时,浓度是负值,但是吸光值是正的。想问各位,这是什么原因,是不是我的蛋白浓度太低了?有没有什么解决的办法啊!由于实验等不了,你懂的!所以急求各位指点迷津!!!!!!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

天道酬勤
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流! 2013-07-09 18:45:58
duoduozuo: 金币+10, 有帮助 2013-07-12 08:41:23
吸光值是正的,浓度是负的话,应该和你做的标准曲线有关系,建议重新做下标准曲线,R值最起码得有两个9吧。还有就是,你的蛋白浓度肯定比较低,所以你可以把标准品做个浓度比较低的曲线。
一步一步!
2楼2013-07-09 10:48:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leechau2007

木虫 (初入文坛)

个人建议换用lorry法,也就是福林酚法,测蛋白质,考马斯亮蓝误差太大,本人使用lorry法测蛋白R的平方可以做到3个9。
3楼2013-07-09 10:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能样品中有些成分干扰蓝色形成。你是否做了溶解样品的缓冲液的对照?
4楼2013-07-09 12:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

电电的开始

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测得浓度值不在标准曲线内,空白组一定要做好,仪器事项要校准调零,该法检测限度是1mg
为自己而开始
5楼2013-07-09 13:25:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

电电的开始

银虫 (小有名气)

加考马斯后5分钟到20分钟内测定
为自己而开始
6楼2013-07-09 13:28:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duoduozuo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yakir at 2013-07-09 10:48:23
吸光值是正的,浓度是负的话,应该和你做的标准曲线有关系,建议重新做下标准曲线,R值最起码得有两个9吧。还有就是,你的蛋白浓度肯定比较低,所以你可以把标准品做个浓度比较低的曲线。

我试试看,谢谢啦
天道酬勤
7楼2013-07-12 08:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duoduozuo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 电电的开始 at 2013-07-09 13:28:46
加考马斯后5分钟到20分钟内测定

是在这个时间范围测定的
天道酬勤
8楼2013-07-12 08:42:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欧阳-90

银虫 (小有名气)

楼主你的问题是怎么解决的呢?最近我在做烟草叶中蛋白质含量测定,测力几次都是吸光度为负值,但是配置的BSA标准曲线吸光度都没有问题。
9楼2015-10-27 20:44:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15202284661

新虫 (初入文坛)

请问你的问题解决了吗?我的问题和你一样一样的,出现了棕色,然后OD值比空白还要小。
10楼2016-03-30 10:45:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 duoduozuo 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +3 瞬息宇宙 2026-09-01 5/250 2026-09-02 08:01 by anjeeshine
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
信息提示
请填处理意见