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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 氧化亚铁硫杆菌固体培养长不出菌落
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hecongren

新虫 (小有名气)

[交流] 氧化亚铁硫杆菌固体培养长不出菌落 已有4人参与

从矿坑水里，用9K液体培养基富集培养，氧化活性很强。
      但是富集后取0.1mL转接到固体培养基上怎么就长不出菌落了呢？
       琼脂条、琼脂粉、琼脂糖都试了，用量也试了0.7%、1%、1.5%几种，但是都失败了。
       恳求各位虫姐虫哥指点。（小弟新手没悬赏，见谅）
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自己选择的路，就是粉身碎骨也要走完
1楼 2013-07-09 10:14:24
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hecongren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanghuiyanyx at 2013-07-10 14:03:01
楼主用的是哪个配方的固体平板？最好看看近几年发表的相关文章参考一下。

看过很多文献，如文献中所述，采用就是9K液体培养基的配方，(NH4)2SO4 3.0, K2HPO4 0.5, KCl 0.1, MgSO4.7H2O 0.5, Ca(NO3)2 0.01加入琼脂。配了无数次平板，只有一次用琼脂粉时，长出了几个菌落，可是接着转接就又不长了。
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自己选择的路，就是粉身碎骨也要走完
3楼2013-07-10 14:50:59
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wanghuiyanyx

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主用的是哪个配方的固体平板？最好看看近几年发表的相关文章参考一下。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-07-10 14:03:01
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henshui005

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
9K 培养基(g) ：(NH4)2SO4 3, KCl 0.1, K2HPO4 0.5,
MgSO4⋅7H2O 0.5, Ca(NO3)2 0.01. 蒸馏水700 mL. pH
3.0，121℃灭菌15 min，加入300 mL 预先配成14.78%
的FeSO4⋅7H2O 溶液并过滤除菌。
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4楼2013-07-10 15:22:42
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hecongren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by henshui005 at 2013-07-10 15:22:42
9K 培养基(g) ：(NH4)2SO4 3, KCl 0.1, K2HPO4 0.5,
MgSO4⋅7H2O 0.5, Ca(NO3)2 0.01. 蒸馏水700 mL. pH
3.0，121℃灭菌15 min，加入300 mL 预先配成14.78%
的FeSO4⋅7H2O 溶液并过滤除菌。

9k液体培养基跟你说的一样，没有问题，关键就是9k固体不长。
固体培养基如下：9k盐溶液400mL+亚铁（44.2或者20g/L都试了）300mL+1g琼脂（琼脂粉、琼脂糖、琼脂条都试了）300mL。pH3.0。
接种0.1mL菌悬浮液，还是不长。
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自己选择的路，就是粉身碎骨也要走完
5楼2013-07-10 15:48:44
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