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ljj0720

银虫 (正式写手)

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[求助] 克隆表达引物设计

急急急现在我知道某基因的全长要扩增全长引物怎么设计啊网上有这样说的：

1、从你的全长基因的正义链直接数出16-20个碱基（从ATG开始），然后在它的5‘端加上游酶切位点，如果需要的话加上保护碱基。
2、从你的全长基因的反义链从5’-3‘端直接数出16-20个碱基，后在它的5‘端加上游酶切位点，如果需要的话加上保护碱基。
这样引物就设计好了。
注意：上下游的酶切位点不要设计反了。

难道不用软件分析吗

[ Last edited by 1949stone on 2013-7-5 at 09:46 ]

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1楼 2013-07-04 15:48:58

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ljj0720

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引用回帖:

21楼: Originally posted by lhs521521 at 2013-07-06 08:49:16
可以给我此基因的mRNA序列吗，包括3‘UTR和5’UTR!...

谢谢我刚刚看见您的回复  我有DNA序列是原核生物
ORIGIN
      1 atgagtttta ggataaatac caatatcgcc gctttaactt ctcatgcggt aggggttcaa
   61 aacaacagag acctttcaag ctcgcttgaa aagttaagct cagggcttag gatcaataaa
   121 gccgctgacg attctagtgg gatggcgatc gctgatagct taaggagtca aagcgcgaat
   181 ttgggtcaag cgatccgcaa cgctaatgac gctattggta tggttcaaac cgcagataaa
   241 gcgatggatg agcaaatcaa aatcttagac accattaaaa ccaaagccgt tcaagccgct
   301 caagacgggc aaactttaga aagccgaaga gccctccaga gcgatattca aaggttgtta
   361 gaagaactag acaatatcgc taacaccaca agctttaacg gccaacaaat gctttcagga
   421 agtttttcta acaaagaatt tcaaattggc gcgtattcta acaccacggt taaggcgtct
   481 attggctcaa cgagctcaga taagattggg catgtgcgca tggaaacttc ttcttttagc
   541 ggtgcaggca tgctcgctag cgcagcggcg caaaacttga ctgaagtggg attgaatttc
   601 aaacaagtca atggcgtgaa cgattataag attgaaaccg tgcgcatttc tacgagtgct
   661 ggcactggga ttggagcgtt aagcgaaatc atcaaccgct tttctaacac cttaggcgtt
   721 agggcctctt ataatgtcat ggccaccggt ggcactcccg tgcaatcagg aactgttagg
   781 gagctcacca ttaatggcgt agaaattggg accgtgaatg atgtgcataa aaacgacgct
   841 gacgggaggt tgactaacgc cattaactcc gtcaaagatc gcaccggcgt ggaagcgagc
   901 ttggatattc aagggcgcat taatttgcac tccattgacg ggcgcgcgat ttctgtgcat
   961 gcagcgagcg cgagcggtca ggtttttggg ggagggaatt ttgcagggat ttctgggaca
   1021 cagcatgcgg ttattgggcg cttaaccttg actaggaccg acgctagaga catcattgta
   1081 agcggtgtga attttagcca tgtgggcttt cattccgctc aaggggtggc agaatacacc
   1141 gtgaatttga gagcggttag gggtattttt gatgcgaatg tggcttcagc agccggagcg
   1201 aacgctaatg gcgcgcaagc ggagaccaat tctcaaggta taggggctgg ggtaacaagc
   1261 cttaaagggg cgatgattgt gatggatatg gcggattcag cgcgcacgca attagacaag
   1321 atccgctcgg atatgggttc ggtgcaaatg gaattggtta caaccattaa taatatttct
   1381 gtaacccaag tgaatgttaa agcggctgaa tctcaaatca gagatgtgga ttttgctgaa
   1441 gagagcgcaa acttttctaa atacaatatt ttggcgcaaa gcgggagttt tgctatggcg
   1501 caagcgaatg cggtgcaaca aaatgtctta aggcttttac aataa