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ljj0720

银虫 (正式写手)

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专业: 流行病学方法与卫生统计

[求助] 克隆表达引物设计

急急急现在我知道某基因的全长要扩增全长引物怎么设计啊网上有这样说的：

1、从你的全长基因的正义链直接数出16-20个碱基（从ATG开始），然后在它的5‘端加上游酶切位点，如果需要的话加上保护碱基。
2、从你的全长基因的反义链从5’-3‘端直接数出16-20个碱基，后在它的5‘端加上游酶切位点，如果需要的话加上保护碱基。
这样引物就设计好了。
注意：上下游的酶切位点不要设计反了。

难道不用软件分析吗

[ Last edited by 1949stone on 2013-7-5 at 09:46 ]

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1楼 2013-07-04 15:48:58

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ljj0720

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引用回帖:

15楼: Originally posted by 547star at 2013-07-04 19:31:38
没问题。翻译的时候到终止密码子就结束了。天然的基因都能表达，你不过是扩增出来克隆到表达载体表达而已。克隆表达时要注意读码框正确。抽空补一下分子生物学的基础知识吧，欠缺太多，会有各种问题，这个时候读书 ...

嗯好的谢谢

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